與IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在來自多個不同物種和亞類的IgG的鉸鏈區域消化,產生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化,產生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點是......KTHT...例如,制備的Fab片段可用于親和力研究、Fab糖基化研究和結構研究。對來自多個物種和亞類的IgG有活性–上鉸鏈區域的消化物;快速-在一小時內生成Fab和Fc片段;有效消化小鼠IgG1。FabULOUS來源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達。FabULOUS的分子量為29kDa,該酶含有His標簽。Genovis的GlySERIAS 是一種獨特的酶。浙江GingisKHANIdeS蛋白酶抗體酶切
Blinatumomab(一種對 CD19 和 T 細胞標志物 CD3 具有特異性的 BiTE 分子)的研究級生物仿制藥在室溫下用固定化過夜的 Genovis的GlySERIAS 消化。通過LC-MS對消解樣品的直接分析表明,所有三個連接子區域均被消解,α-CD3 VL和VH鏈洗脫為一個色譜峰,α-CD19 VH和VL鏈作為單獨的峰洗脫。來自連接的 α-CD3 VH 和 α-CD19 VH 結構域的小峰顯示該短連接子未完全消化,表明 GlySERIAS 對短連接子的活性較低。與完整的蛋白質分析相比,四個結構域的分離提供了具有單同位素分辨率的高質量光譜。可以觀察到每個結構域的幾個不同變體,剩余的連接子殘基數量不同。在色譜分離過程中,α-CD3 VH結構域無法從α-CD19 VH結構域完全基線分離,導致在相關質譜中觀察到一些共洗脫。四個結構域的分離產生了有關在完整蛋白質水平上鑒定的蛋白質修飾位置的信息。例如,在完整水平上鑒定的 37 Da 的蛋白質修飾被分配給 α-CD3 VH 鏈。此外,240Da 和 320da 的兩個修飾分別被分配給 α-CD3 VL 結構域。后者還含有一個帶有五六個組氨酸殘基的 His 標簽。這些數據證明了使用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 對包含多個柔性連接子蛋白進行質量控制的中級工作流程的強大功能。浙江GingisKHANIdeS蛋白酶抗體酶切自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險,并提高通量。
上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學院及生物醫藥產業界人士,于2018年1月共同創立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相關法規要求,如cGMP規范、ISO13485質量管理體系認證等,致力于為診斷領域如分子診斷及病原微生物檢測研發等,藥物研發領域如細胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細胞及外泌體研究等客戶提供合規、高質量物料及專業服務,以期與客戶共同協作,加快研發及生產進度,為客戶提供更多價值。
用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1和IgA2m1,產生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長,因此IgA1和IgA2m1之間來自消化位點的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時間為過夜(16-18小時),并且由于酶的特異性,沒有過度消化的風險。該酶在pH值為6.0至8.0時具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可產生活性。活性為37°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。可精確定位特定的修飾。而無需肽圖分析,可以較少的手動操作時間快速完成。
與IdeS不同,在蛋白質zhiliao藥物的質量控制過程中,詳細分析和識別質量屬性非常重要。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法,這包括確認連接蛋白的質量以及蛋白質接頭的質量。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質結構域來幫助這種質量控制。然而,連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點,導致連接子內多個位點同時水解。消化的產物通常由連接蛋白的幾種變體組成,并保留不同程度的連接子。雖然觀察到的異質性通常不會對蛋白質亞基的詳細表征產生負面影響,但有助于直接表征連接子,但有時需要更均勻的消化產物來詳細分析單個蛋白質結構域。Genovis提供具有低水平內du素的FabRICATOR (IdeS)凍干。浙江GingisKHANIdeS蛋白酶抗體酶切
Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶將ADC(基于 IgG)消化成其亞基,用于表征這類復雜的藥物。浙江GingisKHANIdeS蛋白酶抗體酶切
Genovis除了提供IdeS酶以外,還提供很多種特異性蛋白酶,如半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)。IgdE 在鉸鏈正上方的一個特定位點消化人 IgG1,產生完整的 Fab 和 Fc 片段的均質池。它在pH值和鹽濃度范圍內具有活性,不需要任何還原劑或輔助因子。因此,與許多其他常用的蛋白酶相比,FabALACTICA不需要任何優化來避免過度消化。這使得FabALACTICA成為一種有吸引力的酶,例如在還原和非還原條件下的LC-MS分析、抗體高階結構(HOS)的結晶和NMR研究、雙特異性或多特異性抗體的表征、單價結合研究和完整的Fc聚糖分析。浙江GingisKHANIdeS蛋白酶抗體酶切