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黑龍江GlycINATORIdeS蛋白酶抗體酶切

來源: 發布時間:2024年08月16日

Genovis的FabRICATOR是一種半胱氨酸蛋白酶,它對許多不同的物種和IgG亞類都有活性,包括人IgG亞類1-4以及猴子、兔子、大鼠和綿羊IgG的一些亞類。FabRICATOR在鉸鏈下方的單個位點進行消化,生成F(ab’)2和Fc/2子基,可以進一步還原生成Fd’,輕鏈和F/2子基是必需的。FabRICATOR(IdeS)通過蛋白-蛋白相互作用與目標抗體工作,這說明了它的高特異性。事實上,它在單個位點消化意味著使用FabRICATOR時沒有過度消化的風險,其高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺方法應用于許多不同的抗體。FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來獲得良好活性,也不需要任何額外的輔助因子,它將在不同生理緩沖中發揮作用。這意味著按照下面的鉸鏈消解,您將生成F(ab’)2和Fc/2片段用于分析或其他應用。Genovis的GingisREX (RgpB) 是一種精氨酸特異性蛋白酶。黑龍江GlycINATORIdeS蛋白酶抗體酶切

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Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對處理兔IgG感興趣,請聯系Genovis團隊,我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡單性、速度和可重復性也意味著這種酶可以被用于質量控制應用。 QC方法需要執行簡單,易于訓練,高度可重復,數據易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因為它適用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進行QC工作的客戶將能夠在未來的產品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。北京GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學發現GingisREX精氨酸殘基的特異性,Arg-C在賴氨酸和其他殘基的非特異性。

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Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種獨特的酶,可在鉸鏈區域下方的特定位點消化IgG,產生均勻的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內消化,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG,因此保留了免疫反應性。在37°C下獲得良好的活性,但也可以在室溫下使用較長的反應時間進行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由GenovisAB開發,用于需要高標準和一致性的生物技術應用。有一種檢測FabRICATOR酶的方法。了解有關山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。

與IdeS不同,度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 (GLP-1) 分子組成,它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區域。為了分別研究肽和 Fc 區域,從而鑒定結構域特異性 PTM,用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復雜性,使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明,使用GlySERIAS進行連接子消化后,肽從Fc區域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點,這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體,其中不同數量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外,還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化,但一式三份的酶解在獲得的不同Fc/2變體的相對量中顯示出可重復的結果。可精確定位特定的修飾。而無需肽圖分析,可以較少的手動操作時間快速完成。

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在Genovis,我們的策略是幫助客戶進行中級(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質酶切產品。完整質量和肽圖譜是蛋白質表征的常用方法,我們發現,與簡單但信息有限的完整質量和高度復雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級方法具有優勢。通過執行中級描述,您可以生成從完整的質量實驗中獲得的所有信息,具有額外的優勢。在對抗體進行完整質量分析時,很難明確地識別某些修飾。質譜儀器正在改進,可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實驗可以執行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識別修改,而且你能夠將它們定位到蛋白質上的單個結構域,這是你在完整水平上無法做到的。IgASAP Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1,產生完整且均質的 Fab 和 Fc 片段。北京GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學

木瓜蛋白酶和 Lys-C 等傳統酶可用于生成 Fab 片段,但非特異性酶活性需要仔細優化,降低多個消化位點的風險。黑龍江GlycINATORIdeS蛋白酶抗體酶切

Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對其他物種的 IgG 也有活性,包括來自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此,FabRICATOR的高特異性在某些情況下會使其對鉸鏈區域的突變敏感,并損害酶活性。來自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,與 FabRICATOR 相比,FabRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而,小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,并且不被 FabRICATOR Z 消化。對于這種抗體種類,FabULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。黑龍江GlycINATORIdeS蛋白酶抗體酶切

標簽: 中鹽核酸酶
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