pA-Tn5轉座酶是一種經過改造的高活性Tn5轉座酶,與ProteinA融合,形成一種新型融合酶,應用于CUT&Tag技術中,用于研究蛋白質與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點:1.**高活性**:pA-Tn5轉座酶是超高活性的突變形式,體外轉座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉座酶的N端結構域為ProteinA的一部分,可以與免疫球蛋白的Fc區相互作用,特別是與大多數哺乳動物的IgG結合。3.**Tn5轉座酶活性**:C端結構域為Tn5轉座酶,能夠特異性識別轉座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd),并在形成轉座復合體后隨機插入靶DNA中。4.**應用廣**:適用于CUT&Tag技術、高通量測序建庫、ATAC-seq等,特別適用于早期胚胎發育、干細胞、以及表觀遺傳學等研究領域。5.**操作簡便**:pA-Tn5轉座酶的使用簡化了實驗步驟,可以在一步反應中實現DNA片段化和接頭連接,從細胞到二代測序文庫的轉化過程需9小時。6.**低細胞投入量**:CUT&Tag技術允許從低至60個細胞的樣本中獲得結果,甚至可以應用于單細胞水平的研究。7.**高質量結果**:pA-Tn5轉座酶的使用可以保證DNA片段化,同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低。FnCas12a的雙鏈或單鏈DNA靶標都能激發其反式剪切活性,即在形成三元復合物后,針對非特異序列ssDNA的剪切。Recombinant Mouse CHODL Protein,hFc Tag
磁珠本身并不直接參與電泳過程,但它們可以用于電泳后的樣品處理,特別是在核酸(DNA或RNA)的提取和純化過程中。以下是使用磁珠進行電泳后樣品處理的一般步驟:1.**凝膠電泳**:-首先,將DNA或RNA樣品通過凝膠電泳進行分離。凝膠通常是瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠,根據樣品的大小和類型選擇合適的凝膠濃度和緩沖體系。2.**觀察和切割**:-電泳完成后,使用紫外線照射凝膠并使用適當的染料(如EB或SYBRGreen)對DNA或RNA進行染色,以在紫外光下觀察到DNA或RNA的條帶。3.**樣品提取**:-確定目標DNA或RNA條帶后,使用干凈的工具(如切割器或移液槍)從凝膠中切割出含有目標分子的凝膠片段。4.**磁珠準備**:-根據磁珠試劑盒的說明書,準備磁珠。通常包括磁珠的重懸和可能的表面修飾,以確保它們能夠特異性地結合目標核酸。5.**樣品與磁珠混合**:-將切割出的凝膠片段轉移到含有磁珠的溶液中,溫和地混合以促進磁珠與核酸的結合。6.**磁分離**:-將含有磁珠和核酸的混合物置于磁分離架上,利用磁場使磁珠快速聚集在管底,從而實現與溶液的分離。7.**洗滌**:-移除未結合的溶液,向磁珠上加入洗滌液,再次進行磁分離以去除雜質。Recombinant Mouse CHODL Protein,hFc TagFnCas12a產品不含DNA內切酶和外切酶,也不含RNA酶,保證了實驗的準確性和重復性。
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的應用確實非常廣,主要體現在以下幾個方面:1.**生物制藥**:在生物制藥行業中,確保產品中無核酸酶殘留是非常重要的,以避免潛在的免疫反應或影響藥物的穩定性和效果。2.**重組蛋白純化**:在蛋白質的純化過程中,去除樣品中的核酸酶殘留對于提高純度和防止后續反應的干擾至關重要。3.**疫苗生產**:疫苗制備過程中,去除DNA污染是滿足監管要求和保障疫苗安全性的關鍵步驟。4.**細胞培養**:在細胞培養過程中,去除培養基中的核酸酶殘留有助于防止細胞受到不必要的酶活性影響。5.**分子生物學研究**:在分子生物學實驗中,如PCR、克隆、基因表達分析等,去除樣品中的核酸酶殘留可以避免實驗結果的偏差。6.**食品工業**:在某些食品加工過程中,使用Benzonase核酸酶來降低粘度或去除DNA/RNA,以改善產品特性或滿足特定的質量標準。7.**環境監測**:在環境樣本中檢測核酸酶殘留,以評估環境污染程度或監測特定生物活動。8.**法醫學和醫學診斷**:在法醫學檢測或某些醫學診斷過程中,準確檢測核酸酶殘留對于案件調查或疾病診斷具有重要意義。
T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,屬于RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復以及復制叉重新啟動的過程中扮演著重要角色。T4UvsX重組酶能夠與其他DNA結合蛋白或輔助因子協同作用,與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物。該復合物通過尋找與目標DNA互補的區域進行雜交,以完成鏈置換反應,且此酶本身不具有核酸酶活性。產品應用方面,T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA)技術。它在實驗中與T4UvsY重組酶、BsuDNA聚合酶(大片段)、T4基因32蛋白(gp32)等組分一同使用,以優化RPA擴增反應。T4UvsX重組酶的保存條件為-20℃,可保存3年,或者-20℃儲存有效期為2年,避免反復凍融。其儲存液通常包含Tris-HCl、KCl、DTT、EDTA和甘油等成分,以保持酶的穩定性和活性。熱失活處理為60℃孵育10分鐘。在使用T4UvsX重組酶時,需要注意其保存液中甘油含量較高,建議單獨分裝保存,并且在操作時穿著實驗服并佩戴一次性手套,以確保安全。此外,該產品供科研使用,不應用于臨床診斷。泛素化是一種蛋白質翻譯后修飾過程,涉及將泛素分子共價結合到靶蛋白上。這個過程由一系列酶促反應組成。
5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶通常被稱為腺苷酰化酶(Adenylase),這種酶能夠催化5'端磷酸化的單鏈DNA或RNA(pDNA或pRNA)轉換成5'端腺苷酰化DNA或RNA(AppDNA或AppRNA)。根據搜索結果,該酶的來源是嗜熱古細菌,在大腸桿菌中進行表達并純化而獲得。這種酶在反應中將ATP分解成AMP和PPi,然后將AMP轉移到單鏈DNA的5'磷酸基團上,形成腺苷酰化單鏈DNA,從而制備出腺苷酰化接頭(linker)。此外,一些5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶是MthRNA連接酶(例如NEB#M2611A),這種酶也用于生成高產量的5'腺苷酰化DNA,并且操作簡便,具有超過95%的效率,無需凝膠純化即可完成單步反應。MthRNA連接酶是一種已知能夠在65℃下有效工作的酶,有助于避免DNA的二級結構對腺苷酰化反應的干擾。這些酶的高效率和特異性使得5'DNA腺苷酰化試劑盒在單鏈DNA的5'端腺苷酰化修飾中非常有效,常用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測序建庫或PCR檢測等應用中。與其他Cas12蛋白相比,FnCas12a蛋白的分子量較小,大約在400-700個氨基酸之間。Recombinant Mouse CHODL Protein,hFc Tag
可以利用現有的計算工具,如CRISPR design tools,預測gRNA的活性和特異性,以輔助實驗設計 。Recombinant Mouse CHODL Protein,hFc Tag
熒光探針法是一種利用熒光標記的分子(即熒光探針)來檢測和定量目標分子的方法。這種方法廣泛應用于生物化學、分子生物學和醫學診斷等領域。以下是熒光探針法的一些關鍵特點和工作原理:1.**熒光標記**:熒光探針是一類特殊的分子,它們含有可以發出熒光的化學基團(熒光團)。這些熒光團在受到特定波長的光激發時,會發出特定波長的光。2.**特異性結合**:熒光探針通常設計成能夠特異性地與目標分子結合,如DNA、RNA、蛋白質或其他小分子。這種結合通常是通過分子間的互補性,如氫鍵、疏水作用或離子鍵等實現的。3.**信號變化**:熒光探針在結合目標分子前后,其熒光特性(如熒光強度、波長、壽命等)會發生改變。這種變化可以是增強或減弱,取決于探針的設計和環境條件。4.**檢測原理**:-在**熒光共振能量轉移(FRET)**中,兩個不同的熒光團被設計成靠近,使得一個熒光團(供體)的能量可以非放射性地轉移到另一個熒光團(受體)。當供體和受體之間的距離改變(如由于目標分子的結合)時,FRET效率會改變,從而影響熒光信號。-在**熒光增強或減弱**中,探針的熒光特性直接受到其與目標分子結合的影響。例如,某些探針在結合DNA后,其熒光強度會增強。Recombinant Mouse CHODL Protein,hFc Tag
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin