5'DNA腺苷酰化試劑盒通過特定的酶催化反應,將5'-磷酸化的單鏈DNA(pDNA)轉化為5'-腺苷酰化DNA(AppDNA)。以下是啟用5'-磷酸化的單鏈DNA的一般步驟:1.**準備反應體系**:-根據試劑盒說明書,準備所需的反應組分,包括5'-磷酸化的單鏈DNA、腺苷酰化酶(如Adenylase或MthRNA連接酶)、ATP和相應的緩沖液。2.**混合組分**:-將5'-磷酸化的單鏈DNA與腺苷酰化酶、ATP和緩沖液混合在適當的反應容器中。3.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端。4.**酶失活**:-反應完成后,在85℃孵育5分鐘以失活腺苷酰化酶,這一步是為了防止后續的去腺苷酰化現象,確保腺苷酰化比率不下降。5.**產物收集**:-由于轉化效率高,通常不需要進行凝膠純化步驟。可以通過乙醇沉淀等方法收集腺苷酰化后的DNA產物。6.**產物應用**:-收集的腺苷酰化DNA可以直接用于后續的克隆、測序、連接或其他分子生物學實驗。7.**注意事項**:-確保所有操作在無RNA酶和無DNA酶的環境中進行,以避免污染。-使用時需注意反應體系的準確性,確保底物、酶和ATP的比例適當。
dNTPMix(脫氧核苷酸三磷酸混合溶液)的"特異性"一詞在不同的上下文中可能有不同的含義。在分子生物學領域,特異性通常指的是分子識別和相互作用的精確性。對于dNTPMix,特異性可以指以下幾個方面:1.**堿基特異性**:dNTPMix包含四種dNTPs(dATP、dCTP、dGTP、dTTP),每種對應DNA中的一個特定堿基。在DNA合成過程中,DNA聚合酶確保只有正確的互補dNTP與模板鏈上的堿基配對,這體現了堿基配對的特異性。2.**酶特異性**:某些DNA聚合酶具有校正(proofreading)功能,它們可以識別并修正配對錯誤,提高DNA合成的特異性。3.**應用特異性**:dNTPMix可以為特定的DNA合成應用提供所需的所有四種核苷酸,例如PCR、cDNA合成、DNA測序等。不同的應用可能需要特定的dNTP濃度或配方。4.**質量控制特異性**:dNTPMix在生產過程中會進行質量控制,以確保沒有雜質、DNase和RNase污染,保證產品在實驗中的特異性表現。5.**穩定性和純度特異性**:dNTPMix的穩定性和純度(通常≥99%)對于實驗的成功至關重要,高純度的dNTPMix可以減少非特異性反應的發生。6.**反應條件特異性**:使用dNTPMix時,需要考慮反應條件的特異性,如Mg2+濃度、pH值、溫度等,這些條件都會影響DNA合成的特異性。Recombinant Human Proinsulin C-Peptide AnalogueFnCas12a的C端融合了核定位信號(NLS),有助于FnCas12a進入細胞后定位至細胞核,提高基因編輯效率。
BloodDirectPCRMasterMix(2×)適合血液樣本的PCR擴增主要通過以下幾個方面:1.**抗血液抑制劑能力**:該預混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如膽酸鹽、血紅素、蛋白質等。2.**優化的緩沖體系**:預混合溶液中的緩沖體系經過特別優化,以適應血液樣本中的特定條件,包括pH、離子強度和Mg2+濃度,從而提高PCR擴增的效率和特異性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,能夠在復制DNA時減少錯誤,保證擴增結果的準確性。4.**快速擴增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix產品具有快速擴增的特點,可以縮短PCR實驗的時間。5.**寬泛的GC含量適應性**:該產品可以用于擴增不同GC含量的基因,包括高GC和低GC區域,提高了PCR的適用性。6.**直接使用血液樣本**:無需對血液樣本進行DNA提取或純化,可以直接將抗凝血樣品或干血斑樣品加入PCR反應中。7.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉,適用于不同來源的血液樣本。8.**簡化的操作流程**:由于省去了DNA提取的步驟,BloodDirectPCRMasterMix簡化了實驗操作流程,減少了實驗時間和潛在的污染風險。
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,RT)具有一個關鍵特性:它們通過特定的突變消除了RNaseH活性。RNaseH是一種通常與某些逆轉錄酶相關的酶活性,它能夠降解RNA。然而,在1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中,逆轉錄酶被設計成不具有這種降解RNA的能力,從而在合成cDNA的鏈時保護RNA模板不被降解。以下是1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中逆轉錄過程的一般步驟,以及如何避免RNA降解:1.**RNA模板準備**:首先確保RNA模板的純度和完整性,避免DNA污染。可以通過DNaseI處理去除RNA樣品中的DNA污染。2.**混合反應組分**:將RNA模板、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)、逆轉錄引物(如oligo(dT)或隨機引物)和緩沖液混合。3.**逆轉錄酶添加**:加入經過突變處理的逆轉錄酶,這種酶缺乏RNaseH活性,因此不會在合成過程中降解RNA。4.**逆轉錄反應**:在適宜的溫度下進行逆轉錄反應,逆轉錄酶根據RNA模板合成cDNA鏈。5.**終止反應**:通過加熱至一定溫度來終止逆轉錄反應。Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過重組DNA技術。
pA-Tn5轉座酶是通過將ProteinA與Tn5轉座酶進行融合來構建的。ProteinA是一種來源于金黃色葡萄球菌的蛋白質,它具有高親和力結合大多數哺乳動物IgG抗體的Fc片段的能力。Tn5轉座酶是一種能夠識別特定DNA序列并在基因組上進行“剪切-粘貼”或“復制-粘貼”的酶。融合ProteinA的目的是為了在實驗中實現對特定蛋白質的靶向。下面是pA-Tn5轉座酶融合的一般步驟:1.**基因克隆**:首先,將Tn5轉座酶的基因和ProteinA的基因克隆到一個表達載體中。這通常涉及到分子克隆技術,如PCR擴增、限制性內切酶消化和連接酶連接。2.**融合蛋白設計**:設計一個融合蛋白,其中ProteinA的基因序列和Tn5轉座酶的基因序列通過一個短的連接肽(LinkerPeptide)相連。這個連接肽通常包含幾個氨基酸殘基,以確保兩個蛋白部分在融合后仍能保持各自的構象和功能。3.**表達載體構建**:將融合基因插入到適合的表達載體中,這個載體應該包含適當的啟動子、標記基因(如抗性基因)和終止子,以確保融合蛋白在宿主細胞中得到高效表達。4.**宿主細胞表達**:將構建好的表達載體轉化到宿主細胞(如大腸桿菌)中,通過誘導表達融合蛋白。在目標蛋白的C末端添加His標簽和Avi標簽。有助于通過親和層析進行蛋白純化,而Avi標簽則可以用于生物素。Recombinant Mouse BST2 Protein,hFc Tag
His-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。Recombinant Human CD200/OX2 (His Tag)
轉座酶是一類能夠催化轉座子(一種可移動的DNA序列)在基因組中從一個位置移動到另一個位置的酶。轉座子可以在DNA分子上“跳躍”,在新的位置上插入自己的拷貝,而原始位置的轉座子則可能被切除或保留。轉座酶的作用是轉座過程中的關鍵因素,它們可以被分為兩類:1.**復制型轉座酶**:在復制型轉座過程中,轉座子首先被復制,然后復制的拷貝到新的基因組位置,原始的轉座子留在原位。這種機制通常涉及到“復制-粘貼”的過程。2.**剪切型轉座酶**:在剪切型轉座過程中,轉座子從原始位置被切除,然后到新的基因組位置。這涉及到“剪切-粘貼”的過程。轉座酶的活性和轉座子的移動可以對基因組的結構和功能產生重要影響,包括:-**基因突變**:轉座子的插入可能破壞基因的正常功能,導致突變。-**基因組多樣性**:轉座活動增加了基因組的多樣性,有助于物種適應環境變化。-**基因調控**:轉座子的插入可能激起或抑制某些基因的表達。-**新基因產生**:在某些情況下,轉座子的移動可以導致新基因的產生。
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin