在ADCs（抗體藥物偶聯物）的制備過程中，確保藥物的穩定性和生物活性是至關重要的。以下是幾個關鍵步驟和技術要點：1.**藥物抗體比（DAR）的控制**：DAR是影響ADC穩定性的關鍵因素。通過控制DAR和藥物負荷分布，可以促進ADC的穩定性。DAR值在2-4之間通常被認為是好的選擇，但后面的DAR值需要通過穩定性試驗、體內有效性和藥代動力學共同決定。2.**連接子的選擇**：連接子在化學過程中、血漿循環以及產品儲存過程中的穩定性非常關鍵。連接子的選擇決定了抗體藥物的DAR，并且連接子的穩定性影響著ADC的整體穩定性。3.**有效載荷的選擇**：有效載荷對ADC的毒性和生物活性至關重要。選擇具有高度細胞毒性且能在靶細胞內有效釋放的有效載荷是必要的。同時，有效載荷及其代謝形式決定了ADC分子的毒性。4.**制劑配方的優化**：ADC的制劑配方需要考慮抗體、連接子和有效載荷的穩定性和特性。pH值、緩沖液、離子強度、表面活性劑和抗氧化劑等都可能影響ADC的穩定性。5.**避免聚集**：ADC的聚集傾向比單獨的抗體更高，因此需要采取措施減少聚集，如使用非離子表面活性劑和優化凍干工藝。

SpCas9蛋白（來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白）在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶，能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用：1.**識別和結合**：SpCas9蛋白與一個單導向RNA（sgRNA）結合，形成RNP復合物。這個復合物能夠識別并結合到基因組中與sgRNA互補的特定DNA序列。2.**PAM序列識別**：SpCas9需要一個稱為原間隔子相鄰基序（PAM）的特定序列作為識別目標DNA的先決條件。對于SpCas9，這個PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**：一旦RNP復合物與目標DNA結合，SpCas9就會在PAM序列的3個堿基對的上游位置切割DNA雙鏈，產生一個雙鏈斷裂（DSB）。4.**引發DNA修復**：DNA雙鏈斷裂觸發細胞的DNA修復機制，包括同源定向修復（HDR）和非同源末端連接（NHEJ）。研究人員可以利用這些修復機制來插入、刪除或替換特定的DNA序列。5.**基因修改**：通過HDR，可以在斷裂的DNA兩端引入特定的DNA模板，從而實現精確的基因編輯。而NHEJ通常會導致小的插入或缺失（indel），這可以用來產生基因的敲除或敲入。6.**提高編輯效率**：為了提高SpCas9的編輯效率，研究人員可能會使用優化的sgRNA設計、蛋白質工程或嵌合融合蛋白等策略。

NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白，它在N端和C端都添加了核定位信號（NLS），這使得它能夠更有效地進入細胞核并進行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統的引導RNA（gRNA）形成穩定的核糖核的蛋白（RNP）復合物，可以在進入細胞后立即定位到細胞核，從而誘導特定的DNA雙鏈斷裂，實現基因編輯。與傳統的mRNA或質粒系統相比，使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉錄和翻譯過程，因此可以避免將外源DNA插入基因組的風險，這對于基因編輯尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特點包括：1.無DNA：系統不添加外部DNA，降低了插入外源DNA的風險。2.高切割效率：雙NLS確保Cas9蛋白高效進入細胞核。3.低脫靶效應：Cas9核酸酶的瞬時表達提高了切割的特異性。4.節省時間：無需轉錄和翻譯過程。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA，以及通過電穿孔或注射與特定gRNA結合時的體內基因編輯。產品的保存條件通常是在-25~-15℃，有效期為一年。使用時，可以根據推薦的反應體系進行體外DNA裂解實驗，并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測消化效率。具體產品的詳細信息和應用指南，可以參考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料。

EndoS糖苷內切酶S（Endo-S）的特異性主要體現在其對糖蛋白的糖鏈結構的識別和切割能力上。以下是Endo-S的一些關鍵特異性特點：1.**糖鏈識別**：Endo-S能夠特異性識別糖鏈結構中的某些特定序列或結構，尤其是N-連接糖鏈的殼二糖重要結構。2.**切割位點**：Endo-S在糖鏈的特定位點進行切割，通常是在N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間的β-N-糖苷鍵。3.**不影響抗原性**：Endo-S的切割位點選擇性高，不會破壞糖蛋白的抗原決定簇，因此在某些應用中可以保持糖蛋白的免疫原性。4.**應用多樣性**：Endo-S可以用于多種糖蛋白的去糖基化，包括抗體和其他具有N-連接糖鏈的蛋白質。5.**研究和藥物開發**：在研究糖蛋白的結構和功能時，Endo-S提供了一種工具來研究糖鏈對蛋白質性質的影響。此外，在藥物開發中，Endo-S用于制備糖鏈定點ADC化合物，通過精確控制藥物與抗體的連接點，提高藥物的療效和減少副作用。6.**兼容性**：Endo-S對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性，可以接受不同生物正交基團、熒光基團等衍生物作為底物，實現抗體糖基化修飾。7.**高效性**：Endo-S在催化糖鏈轉移或切割反應中表現出高效性，有助于實現高效獲得功能修飾的糖工程抗體。由于Pfu DNA Polymerase 對引物的質量要求較高，使用純度高的引物可以減少由于引物錯誤導致的非目標突變。

重組增強型綠色熒光蛋白（RecombinantEnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP）是一種用于生物科學研究的工具。以下是重組EGFP的一些特點和應用：1.**高熒光強度**：EGFP比野生型GFP具有更強的熒光，這使得它在成像和檢測時更為敏感和有效。2.**改進的折疊效率**：EGFP在生理溫度（如37℃）下的折疊效率更高，這有助于在細胞內快速形成成熟的熒光蛋白。3.**單一激發峰**：與野生型GFP相比，EGFP具有單一的激發峰，這簡化了成像條件的設置，并提高了信號的穩定性。4.**適合多種生物系統**：EGFP可以用于多種生物系統，包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞。5.**多功能性**：EGFP可以作為報告基因用于基因表達分析，也可以作為融合標簽用于蛋白質定位和動態研究。6.**非糖基化**：在大腸桿菌中表達的重組EGFP是非糖基化的，這有助于減少翻譯后修飾的復雜性。7.**純度高**：重組EGFP通常具有高純度，適合用于各種生物化學和分子生物學實驗。8.**穩定性**：EGFP的熒光穩定性好，適合長時間觀察和成像。9.**分子量**：重組EGFP的分子量約為26.9kDa，由239個氨基酸構成。利用His標簽通過親和層析從細胞裂解物中純化目標蛋白，然后可能通過離子交換層析、等方法進一步提純。Recombinant Mouse TNFRSF11B Protein,His Tag

FnCas12a不僅可用于體外dsDNA的特異剪切，也可用于靶標核酸的快速檢測，如HOLMES核酸快檢技術。Recombinant Cynomolgus ADAM9 Protein,His Tag

酵母重組表達的PNGaseF（N-糖苷酶F）是一種用于蛋白質去糖基化實驗的酰胺水解酶，具有以下特點以確保實驗中的活性和穩定性：1.**高效性**：具有高比活性，例如750000U/mL，這有助于快速高效地進行去糖基化反應。2.**穩定性**：在含有50%甘油的儲存緩沖液中，比較好的活性和穩定性可維持長達24個月。3.**使用條件**：可以在原生或變性條件下使用，對于變性條件下的去糖基化，建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用。4.**儲存條件**：建議在-15~-25℃保存，有效期1年。5.**酶活定義**：1個酶活力單位指在10μL的反應體系中，37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。6.**操作簡便**：提供了使用說明，包括變性和非變性條件下的蛋白質去糖基化步驟。7.**His標簽**：產品帶有His標簽，便于在實驗中進行純化和檢測。8.**純度**：純度達到95%以上，通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進行確定。9.**快速反應**：有些產品如FastPNGaseF，可以在數分鐘內完成徹底且無偏好性地去糖基化。10.**注意事項**：產品供科研使用，操作時應穿戴適當的實驗室防護裝備。遵循這些指導原則和產品說明，可以確保PNGaseF在實驗中的活性和穩定性，從而獲得可靠的去糖基化結果。Recombinant Cynomolgus ADAM9 Protein,His Tag