質(zhì)粒DNA提取后的儲存條件對于保持其活性至關(guān)重要。以下是一些推薦的儲存方法:1.**干燥保存**:質(zhì)粒DNA以干粉狀態(tài)保存是比較好的方法。如果總DNA以溶液形式保存,可以使用1×TE緩沖液稀釋,且TE緩沖液的pH值應(yīng)為8.0-8.5之間。2.**低溫保存**:植物總DNA低溫保存比較好在-80℃以下或液氮保存。如果沒有條件,也可以在-20℃保存。總DNA應(yīng)避免經(jīng)常凍融,同時建議每份樣品保存3-5個樣本。總DNA提取后保存的時限通常較組織要長(>兩年),但若長期保存,每隔兩年應(yīng)抽測,對不符合使用要求的DNA進行更新。3.**避免反復(fù)凍融**:反復(fù)凍融會破壞DNA的完整性和活性,因此應(yīng)盡量避免。4.**使用保護劑**:化學(xué)添加劑如二甲基亞砜(DMSO)可以防止DNA單鏈斷裂,但因其毒性和使用量的問題,并不是理想的保護劑。5.**封裝技術(shù)**:通過封裝技術(shù)保存DNA,可以隔絕外界水、氧氣和光等可能影響DNA穩(wěn)定的因素。例如,DNAshell®技術(shù)基于密封的不銹鋼微型膠囊,在惰性氣氛下,給予DNA干粉保護。6.**使用穩(wěn)定劑**:一些天然的雙糖,如海藻糖,被認為是一種多功能的保護劑,可以保護生物體免受冷凍、加熱等不利條件的影響。UDG在結(jié)構(gòu)上屬于單功能DNA糖基化酶,它通過沿著DNA鏈滑動,識別尿嘧啶分子,進行堿基切除。Recombinant Human CEACAM-3 Protein,His Tag
BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶在分子生物學(xué)實驗中都是常用的酶,但它們之間存在一些關(guān)鍵的不同點:1.**來源和熱穩(wěn)定性**:-**TaqDNA聚合酶**來源于嗜熱菌Thermusaquaticus,具有很好的耐熱性,能夠承受PCR的熱變性步驟。-**BstDNA聚合酶**來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus),同樣具有較高的熱穩(wěn)定性,適用于等溫擴增,如LAMP技術(shù),無需PCR熱循環(huán)。2.**酶活性**:-**TaqDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和5'-3'外切酶活性,但沒有3'-5'外切酶活性。這意味著它在DNA合成過程中可以校正一些錯誤,但保真性相對較低。-**BstDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和強鏈置換活性,但缺乏5'-3'外切酶活性。這使得它在等溫擴增中更為有效,尤其是在需要高保真度和快速擴增的應(yīng)用中。3.**應(yīng)用領(lǐng)域**:-**TaqDNA聚合酶**主要用于PCR技術(shù),適用于各種DNA片段的擴增,包括復(fù)雜模板和長片段的擴增。-**BstDNA聚合酶**特別適用于等溫擴增技術(shù),如LAMP,這些技術(shù)不需要溫度循環(huán),適用于快速、低成本的DNA擴增。4.**擴增速度和效率**:-**BstDNA聚合酶**在等溫擴增中顯示出比傳統(tǒng)TaqDNA聚合酶更快的擴增速度和更高的產(chǎn)量,尤其是在優(yōu)化的LAMP反應(yīng)中。
牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)與細菌DNA拓撲異構(gòu)酶的主要區(qū)別如下:1.**來源不同**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I來源于牛痘病毒,是一種真核生物病毒中的酶。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶則來源于原核生物,如大腸桿菌的ω蛋白等。2.**功能特性**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I能夠解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu),并且識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT],與DNA形成共價連接形成穩(wěn)定復(fù)合物,遇到DNA的5’-OH基團后,重新連接形成完整DNA鏈。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶,如大腸桿菌的ω蛋白,主要功能是催化DNA鏈斷開和結(jié)合的偶聯(lián)反應(yīng),以改變DNA的拓撲結(jié)構(gòu)。3.**活性條件**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I即使在Mg2+不存在的條件下也顯示活性。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶可能需要Mg2+等金屬離子作為輔因子來發(fā)揮活性。4.**作用的DNA鏈**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I能使正負兩方的超螺旋分子均形成松散型。-原核生物由來的DNA拓撲異構(gòu)酶I只作用負鏈的超螺旋分子。5.**共價鍵形成**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I與DNA形成共價連接,此酯鍵中所貯存的能量可能在切斷端的再結(jié)合上起著作用。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶在原核生物中是游離型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端與酶形成共價鍵。
磁珠法病毒RNA/DNA抽提試劑盒是一種高效、便捷的工具,適用于從各種生物樣本中提取病毒核酸。以下是一些相關(guān)產(chǎn)品的信息和特點:1.**德諾優(yōu)品病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-采用自主磁珠純化技術(shù),適合從血漿、血清等樣本中分離純化病毒的DNA或RNA。-操作簡單,整個過程可在12-25分鐘內(nèi)完成,提取的核酸可直接用于下游應(yīng)用,如PCR和NGS等。-提取的核酸純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合低拷貝數(shù)的病毒檢測。2.**MolPure®磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、腦脊液等樣本中提取病毒核酸。-無需使用有毒的酚氯仿,安全快捷,提取過程可在40分鐘內(nèi)完成。-提取的產(chǎn)物可直接用于PCR、qPCR等實驗。3.**FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適合從全血、唾液、拭子等樣本中純化高質(zhì)量病毒核酸,提取過程只需13分鐘。-無需使用有毒的化學(xué)試劑,操作安全便捷。4.**MagMAX病毒RNA/DNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、口腔液等樣本中提取病毒核酸。-該試劑盒支持高通量提取,適合自動化操作,提取效率高,適合直接用于PCR和RT-PCR。
磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應(yīng)用非常廣,主要包括以下幾個方面:1.**PCR產(chǎn)物的純化**:磁珠法試劑盒可以從PCR反應(yīng)液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、鹽類等雜質(zhì),回收率高,產(chǎn)物純度好,可以直接應(yīng)用于PCR、連接、測序、NGS建庫等下游實驗。2.**基因組DNA的提取**:適用于從血液、唾液、口腔拭子和動物組織等樣品中分離純化高質(zhì)量基因組DNA,提取的DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合高通量工作站的自動化提取。3.**質(zhì)粒DNA的提取**:磁珠用于從粗制的提取物中分離質(zhì)粒DNA,通過精心優(yōu)化的溶液將質(zhì)粒DNA從基因組DNA和蛋白質(zhì)中分離出來。4.**DNA片段的分離**:有許多類型的DNA分離試劑盒可供選擇,包括DNA片段的分離。DNA片段可能需要為下一代測序協(xié)議進行分離,在這種情況下,可以用能選擇分子大小的磁珠來分離片段。5.**自動化和高通量操作**:磁珠法試劑盒適合手工操作,也可用于自動化工作站或核酸自動提取儀,實現(xiàn)高通量操作。6.**分子生物學(xué)研究**:磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進化研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,為遺傳病研究、篩查等提供了強有力的技術(shù)支持。隨后,泛素分子從E1轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2,再通過泛素連接酶E3的作用,將泛素分子連接到靶蛋白上。Recombinant Human IL-12B/p40/NKSF2 Protein,His Tag
Probe qPCR Mix (2×)通常含有熱啟動DNA聚合酶,這種聚合酶在高溫下激發(fā),可以減少非特異性擴增 。Recombinant Human CEACAM-3 Protein,His Tag
在比較BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶對于復(fù)雜DNA片段擴增的適用性時,以下是一些關(guān)鍵點:1.**TaqDNA聚合酶**:-TaqDNA聚合酶因其高熱穩(wěn)定性和擴增效率而被應(yīng)用于常規(guī)PCR。它擴增速度為30-60秒/kb,缺乏3'→5'核酸外切酶活性,無校正功能,易產(chǎn)生錯配堿基。-對于結(jié)構(gòu)復(fù)雜的模板,如GC含量高、有二級結(jié)構(gòu)等,TaqPlus可以用于擴增,能有效地擴增10kb以下的片段。-有產(chǎn)品如TitaniumTaqDNA聚合酶,它是通過基因工程改造的Taq酶,缺失了5'-3'外切酶活性,具備更強大的擴增性能,適合擴增高度復(fù)雜的DNA混合物。2.**BstDNA聚合酶**:-BstDNA聚合酶具有高適溫度,能夠適應(yīng)更加苛刻的擴增條件,同時消除DNA二級結(jié)構(gòu),因而能夠準確并且均勻地擴增全基因組序列。-BstDNA聚合酶大片段能夠優(yōu)先擴增短片段的DNA,并且能夠確保擴增得到的DNA覆蓋了整個基因組,連貫并且無偏地擴增所有的遺傳位點。-翌圣生物HieffCanace®PlusHigh-FidelityDNAPolymerase基于PfuDNA聚合酶改造而成,其保真性是Taq酶的83倍,Pfu酶的9倍,擴增速度高達10秒/kb,擴增目的片段長達13kb,具有極強的擴增效率的模板適應(yīng)性,非常適合復(fù)雜模板的高保真擴增。
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin