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Recombinant Canine EMMPRIN/CD147 Protein

來源: 發布時間:2024年12月01日

嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶I(BstDNAPolymeraseI)和它的大片段(LargeFragment)是兩種在分子生物學實驗中常用的酶。它們的主要區別在于結構和活性:1.**結構**:-完整的BstDNAPolymeraseI包含一個5'→3'的核酸外切酶活性區域,而大片段是通過基因工程改造或蛋白酶處理去掉了這個外切酶活性區域的酶。因此,大片段沒有5'→3'的核酸外切酶活性,但保留了5'→3'的DNA聚合酶活性。2.**活性**:-BstDNAPolymeraseI具有5'→3'的核酸外切酶活性,這意味著它在合成DNA的同時可以“校對”錯誤,切除不匹配的核苷酸。而大片段由于缺少外切酶活性區域,不具有這種校對能力。-大片段具有更強的鏈置換能力,這使得它非常適合于等溫擴增反應,如環介導的等溫擴增(LAMP)和滾環擴增(RCA)。3.**應用**:-BstDNAPolymeraseI由于具有校對功能,可能更適合于需要高保真度的DNA合成反應。-BstDNAPolymerase,LargeFragment由于其鏈置換能力,更適合于等溫擴增技術,這些技術不需要熱循環儀,可以在恒定溫度下進行DNA擴增。4.**熱穩定性**:-BstDNAPolymerase,LargeFragment通常在65°C左右的溫度下進行反應,而BstDNAPolymeraseI可能具有更寬的反應溫度范圍。去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes, DUBs)可以去除泛素化蛋白上的泛素鏈,使泛素分子得以回收和再利用。Recombinant Canine EMMPRIN/CD147 Protein,His Tag

Recombinant Canine EMMPRIN/CD147 Protein,His Tag,標準物質

在質粒DNA提取過程中,確保DNA的完整性和活性至關重要,這通常涉及以下幾個關鍵因素:1.**溫和的裂解條件**:選擇適當的裂解方法對于保持DNA的完整性至關重要。對于大于15kb的質粒DNA,應采用溫和的裂解方法,如將細菌懸浮于等滲的葡萄糖溶液中,加入溶菌酶和EDTA破壞細胞壁和細胞膜,以減少對質粒DNA的機械剪切力,從而保護其完整性。2.**避免過度裂解**:在質粒提取過程中,并非裂解時間越長越好。過長的裂解時間可能會造成基因組DNA片段的污染,影響質粒的純度。3.**適當的洗滌和洗脫**:在純化過程中,適當的洗滌可以去除蛋白質和其他雜質,但過度洗滌可能會導致DNA的損失。洗脫步驟中,確保洗脫液完全浸潤柱膜,以保證結合在柱膜上的質粒得以充分洗脫,避免因洗脫體積過小而影響質粒得率。4.**避免DNA的降解**:在提取過程中,添加核酸酶抑制劑可以防止DNA被核酸酶降解。同時,避免長時間將DNA暴露在室溫下,以及避免多次凍融循環,這些都有助于保護DNA的完整性。5.**低溫操作**:盡量在低溫條件下進行提取操作,以減少核酸酶的活性,從而保護DNA的完整性。

Recombinant Canine CD46 Protein,His Tag泛素蛋白是一種在真核細胞中存在的小分子蛋白質,由76個氨基酸殘基組成,具有高度的保守性。

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核酸內切酶VIII(EndonucleaseVIII)和核酸內切酶III(EndonucleaseIII)都是DNA修復酶,但它們之間存在一些關鍵的區別:1.**活性類型**:-**核酸內切酶VIII**:具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。N-糖基化酶活性可以釋放受損的嘧啶堿基,如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇,產生一個脫嘌呤(Apurinic,AP)位點;AP裂解酶活性可以切割AP位點的3'和5'端,產生一個具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。-**核酸內切酶III**:主要具有β裂解酶(β-lyase)活性,能夠切割DNA磷二酯骨架在AP位點處,但不具備δ裂解酶(δ-lyase)活性。2.**識別和切除的受損堿基**:-**核酸內切酶VIII**:可以識別并切除包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲在內的多種受損堿基。-**核酸內切酶III**:主要識別和切除氧化性損傷的嘌呤堿基,如8-氧鳥嘌呤。3.**裂解酶活性**:-**核酸內切酶VIII**:具有β和δ裂解酶活性,而**核酸內切酶III**具有β裂解酶活性。這些區別決定了它們在DNA損傷修復中的作用和應用范圍。

Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在PCR產物的克隆中主要應用在以下幾個方面:1.**單鏈DNA的生成**:-Lambda核酸外切酶可以用于從雙鏈DNA中生成單鏈DNA。由于該酶沿5'→3'方向逐步切去5'單核苷酸,底物是5'磷酸化的雙鏈DNA,因此可以用來消化PCR產物中的一條鏈,從而生成單鏈DNA,這對于某些克隆技術來說是必要的步驟。2.**PCR產物的克隆**:-在克隆過程中,有時需要將PCR產物的5'端磷酸化,以便與載體連接。Lambda核酸外切酶可以消化非磷酸化的DNA,從而在一定程度上幫助準備適合克隆的PCR產物。3.**減少自身環化和非特異性連接**:-在連接反應中,為了減少質粒載體的自身環化,可以使用堿性磷酸酶處理質粒DNA以去除5'磷酸基團。而Lambda核酸外切酶可以消化5'端磷酸化的DNA,因此在某些情況下,它可以輔助減少PCR產物的自身環化,尤其是在PCR產物和質粒載體的連接反應中。4.**提高克隆效率**:-通過消化PCR產物中的一條鏈,Lambda核酸外切酶可以幫助減少PCR產物的非特異性連接,從而提高克隆的效率和準確性。綜上所述,Lambda核酸外切酶在PCR產物的克隆中主要通過生成單鏈DNA、準備適合克隆的PCR產物、減少自身環化和非特異性連接以及提高克隆效率等方面發揮作用。UBE2L3作為泛素化途徑中的關鍵酶,其在蛋白質降解、信號傳導、細胞周期控制等重要內容有著作用。

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磁珠法病毒RNA/DNA抽提試劑盒是一種高效、便捷的工具,適用于從各種生物樣本中提取病毒核酸。以下是一些相關產品的信息和特點:1.**德諾優品病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-采用自主磁珠純化技術,適合從血漿、血清等樣本中分離純化病毒的DNA或RNA。-操作簡單,整個過程可在12-25分鐘內完成,提取的核酸可直接用于下游應用,如PCR和NGS等。-提取的核酸純度高,質量穩定可靠,適合低拷貝數的病毒檢測。2.**MolPure®磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、腦脊液等樣本中提取病毒核酸。-無需使用有毒的酚氯仿,安全快捷,提取過程可在40分鐘內完成。-提取的產物可直接用于PCR、qPCR等實驗。3.**FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適合從全血、唾液、拭子等樣本中純化高質量病毒核酸,提取過程只需13分鐘。-無需使用有毒的化學試劑,操作安全便捷。4.**MagMAX病毒RNA/DNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、口腔液等樣本中提取病毒核酸。-該試劑盒支持高通量提取,適合自動化操作,提取效率高,適合直接用于PCR和RT-PCR。

Ultra-Long Master Mix 是一種用于長片段PCR擴增的預混液,它含有經過特殊修飾的熱穩定Taq DNA聚合酶。Recombinant Canine CD46 Protein,His Tag

FnCas12a可以識別不同的PAM序列,例如5'-TTN-3',這增加了它可以靶向的基因組區域 。Recombinant Canine EMMPRIN/CD147 Protein,His Tag

BsuDNAPolymerase(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶)在PCR中的應用具有多個優勢,以下是一些關鍵點:1.**鏈置換活性**:BsuDNAPolymerase具有很強的鏈置換活性,這使得它非常適合于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA)。在這些技術中,BsuDNAPolymerase可以快速、高效、特異性地擴增模板,在10到30分鐘內將痕量的核酸模板(低至單拷貝)擴增至可以檢出的水平。2.**高溫穩定性**:BsuDNAPolymerase在高溫下保持活性,這使得它在一些需要高溫反應的實驗條件下表現出色。3.**高靈敏度和特異性**:BsuDNAPolymerase在等溫擴增中展現出高靈敏度,能夠將微量核酸模板擴增到可檢測水平。同時,它也具有高特異性,減少了非特異性擴增的風險。4.**簡化的樣品處理**:BsuDNAPolymerase可以直接對復雜樣品進行擴增,無需事先進行復雜的核酸純化和提取步驟,節省了時間和成本。5.**可擴增DNA和RNA**:BsuDNAPolymerase不僅可以擴增DNA,還可以直接擴增RNA,省去了額外的逆轉錄反應(cDNA合成)步驟,這對于RNA的檢測和分析更加方便快捷。6.**無核酸外切酶和RNase殘留**:BsuDNAPolymerase在生產過程中確保無核酸外切酶、切口酶及RNase殘留,這有助于提高實驗的準確性和重復性。Recombinant Canine EMMPRIN/CD147 Protein,His Tag

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