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Recombinant Mouse PGF Protein

來源: 發布時間:2025年01月27日

Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個步驟:1.**識別與結合**:-Cre重組酶首先識別并分別結合兩個LoxP序列的兩個反向重復序列,形成一個二聚體。2.**四聚體形成**:-兩個二聚體互相靠近,形成由四個Cre分子與兩個LoxP位點結合形成的四聚體復合物。3.**DNA切割與交換**:-Cre重組酶在每個LoxP位點的間隔序列中引導單鏈切割,產生帶有3’端羥基的斷裂。每個LoxP位點的兩個單鏈分別被切割。切割產生的自由3’端與對側的3’端進行交換和重連,形成Holliday交叉結構。4.**分子重組與解旋**:-Holliday交叉結構通過Cre酶的作用被解旋并重組,形成新的重組產物。這個過程導致兩個LoxP位點之間的DNA序列被刪除、反轉或易位,具體效果取決于LoxP序列的排列方式(方向和位置)。5.**條件性基因編輯**:-通過建立特異性Cre小鼠,該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動子驅動,可在特定細胞或組織或全身表達Cre重組酶。與帶有Lox位點的Flox小鼠雜交,子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠,實現條件性基因打靶(表達或敲除靶基因)。在某些糖蛋白的純化方案中,利用 Endo H 對糖鏈的特異性水解作用,去除糖蛋白上的糖鏈。Recombinant Mouse PGF Protein,hFc Tag

Recombinant Mouse PGF Protein,hFc Tag,標準物質

耐高鹽全能核酸酶(SaltActiveUltraNuclease)是一種重組非特異性核酸內切酶,具有以下特點和應用:1.**來源與表達**:耐高鹽全能核酸酶來源于海洋微生物,通過基因工程改造在大腸桿菌(_Escherichiacoli_)中表達純化。2.**活性條件**:在0.5MNaCl條件下具有比較好活性,這使得它在高鹽環境下也能保持高效。3.**應用領域**:-**病毒純化、疫苗生產**:作為宿主殘留核酸去除試劑,將宿主殘留核酸降至皮克(pg)級別,提高生物制品功效和安全性。-**蛋白和多糖類制藥工業**:用于去除核酸污染,降低細胞上清和細胞裂解液的粘度,提高蛋白純化效率及功能研究。-**防止細胞結團**:有效防止細胞和疫苗研究中外周血單核細胞(PBMC)的結團。4.**產品性質**:-分子量:24.7kDa。-等電點:9.61。-純度:≥99%。-酶活:250-300U/μL。-適溫度:37℃(工作范圍0-42℃)。-輔助因子:1-10mMMg2+。5.**儲存條件**:以無菌液體酶的形式提供,儲存于緩沖液(25mMTris-HCl,5mMMgCl2,500mMNaCl,50%Glycerol,pH7.5)中,無色透明液體。干冰運輸,-15℃~-25℃保存,有效期2年。Recombinant Human CEACAM-7 Protein,hFc Tag在一項研究中,比較了具有不同NLS融合的Cas9蛋白和Cas9 mRNA在斑馬魚基因組編輯中的效率。

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T5核酸外切酶在基因克隆中的優勢主要體現在以下幾個方面:1.**高效性**:T5核酸外切酶依賴性組裝(TEDA)方法在常規克隆中的效率與使用專有DNA聚合酶的商業In-Fusion方法相似,但高于使用T5核酸外切酶、PhusionDNA聚合酶和DNA連接酶的Gibson方法。2.**低成本**:TEDA方法每個反應使用0.04U的T5核酸外切酶,價格為0.25美分,具有很高的成本效益。3.**簡單性**:TEDA方法的反應混合物非常簡單,易于操作,這使得它在預算有限的實驗室中尤其有用。4.**靈活性**:TEDA方法能夠組裝多個DNA片段,并在多個位點同時進行定點誘變,提供了一種靈活的克隆和突變方法。5.**陽性克隆率**:使用T5核酸外切酶的無縫克隆技術可以確保100%的陽性克隆率,這提高了實驗的成功率。6.**協同作用**:在無縫克隆中,T5核酸外切酶與Phusion高保真DNA聚合酶和TaqDNA連接酶協同作用,通過切割、填補和連接三個步驟,高效地完成DNA片段的連接。7.**減少污染**:T5核酸外切酶可以降解堿裂解提取質粒中的變性DNA,減少超螺旋DNA的污染,提高DNA克隆和轉染效率。這些優勢使得T5核酸外切酶成為基因克隆中一個非常有價值的工具,尤其是在需要高效、低成本和操作簡便的實驗環境中。

BstDNA聚合酶在等溫擴增中的優勢主要包括以下幾點:1.**高靈敏度和擴增效率**:BstDNA聚合酶具有鏈置換能力,能夠在恒溫條件下快速、高效、特異性地擴增模板。翌圣生物的BstPlusDNAPolymerase靈敏度超高,低至5copies目的基因可測,且始終能比競品更快達到閾值,擴增速率更快。2.**高dUTP耐受性**:BstPlusDNAPolymerase具有較高的dUTP耐受性,在反應體系中添加dUTP對BstPlusDNAPolymerase的靈敏度及擴增效率無影響,這使得它在防污染系統中表現出色。3.**快速擴增**:使用BstDNA聚合酶的等溫擴增技術,如LAMP,可以在15-60分鐘內實現109-1010倍的擴增,顯示出快速的擴增能力。4.**熱穩定性**:BstDNA聚合酶具有較強的熱穩定性,能在60-65℃的恒溫條件下保持活性,這使得它非常適合于不需要溫度循環的等溫擴增技術。5.**簡化的反應設置**:Bst3.0DNAPolymerase優化了Loop-MediatedIsothermalDNAAmplification(LAMP)反應,簡化了反應設置,可以實現單酶RT-LAMP反應。6.**抗抑制劑能力強**:Bst3.0DNAPolymerase即使在高濃度的擴增抑制劑中,包括dUTP,也能展現出強大的性能。

與其他Cas12蛋白相比,FnCas12a蛋白的分子量較小,大約在400-700個氨基酸之間。

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在比較BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶對于復雜DNA片段擴增的適用性時,以下是一些關鍵點:1.**TaqDNA聚合酶**:-TaqDNA聚合酶因其高熱穩定性和擴增效率而被應用于常規PCR。它擴增速度為30-60秒/kb,缺乏3'→5'核酸外切酶活性,無校正功能,易產生錯配堿基。-對于結構復雜的模板,如GC含量高、有二級結構等,TaqPlus可以用于擴增,能有效地擴增10kb以下的片段。-有產品如TitaniumTaqDNA聚合酶,它是通過基因工程改造的Taq酶,缺失了5'-3'外切酶活性,具備更強大的擴增性能,適合擴增高度復雜的DNA混合物。2.**BstDNA聚合酶**:-BstDNA聚合酶具有高適溫度,能夠適應更加苛刻的擴增條件,同時消除DNA二級結構,因而能夠準確并且均勻地擴增全基因組序列。-BstDNA聚合酶大片段能夠優先擴增短片段的DNA,并且能夠確保擴增得到的DNA覆蓋了整個基因組,連貫并且無偏地擴增所有的遺傳位點。-翌圣生物HieffCanace®PlusHigh-FidelityDNAPolymerase基于PfuDNA聚合酶改造而成,其保真性是Taq酶的83倍,Pfu酶的9倍,擴增速度高達10秒/kb,擴增目的片段長達13kb,具有極強的擴增效率的模板適應性,非常適合復雜模板的高保真擴增。

Cas12a不僅具有順式切割活性,還具備獨特的反式切割活性,這使得它能夠無差別地裂解附近的單鏈DNA。Recombinant Mouse IL-7R alpha/CD127 Protein,hFc Tag

Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過重組DNA技術。Recombinant Mouse PGF Protein,hFc Tag

在DNA提取過程中避免RNA污染的關鍵在于采取一系列措施來確保RNA被有效去除或降解,同時保護DNA的完整性和純度。以下是一些確保DNA提取過程中避免RNA污染的策略:1.**使用專門的DNA提取試劑盒**:選擇高質量的DNA提取試劑盒,這些試劑盒通常已經包含了防止RNA污染的措施,如特定的裂解液和純化步驟,能夠有效去除RNA。2.**加入RNA酶(RNase)處理**:在DNA提取過程中加入RNase處理步驟,可以有效地去除殘留的RNA污染。RNase是一種能夠特異性降解RNA的酶,可以在不影響DNA完整性的前提下去除RNA污染。3.**優化實驗操作步驟**:在破碎細胞時,選擇合適的破碎方法和破碎時間,避免過度破碎導致RNA的釋放;在DNA純化階段,控制好離心速度和時間,避免RNA的沉淀。4.**使用無RNase的試劑和耗材**:使用經過RNase-free處理的實驗器材和試劑,確保實驗過程中不會引入外源性RNA污染。5.**嚴格控制實驗環境**:保持實驗室臺面和工作區域干凈無塵,定期對實驗室進行消殺,避免RNA酶污染。6.**個人防護和操作規范**:在處理DNA樣品時,佩戴無菌手套和口罩,以減少呼吸道和皮膚污染的風險。使用不同的工具處理不同的樣品,或者在處理前后徹底清洗工具,避免交叉污染。Recombinant Mouse PGF Protein,hFc Tag

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