BstDNAPolymerase,LargeFragment（嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段）是一種經(jīng)過改造的酶，它來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillusstearothermophilus）DNA聚合酶I，通過重組技術(shù)在大腸桿菌中表達(dá)并純化獲得。這種酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性，但不具有5'→3'的核酸外切酶活性，因此它在等溫擴(kuò)增反應(yīng)中非常有用，如環(huán)介導(dǎo)的等溫擴(kuò)增（LAMP）和滾環(huán)擴(kuò)增（RCA）等。以下是BstDNAPolymerase,LargeFragment的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用：1.**等溫擴(kuò)增**：BstDNAPolymerase,LargeFragment具有很強(qiáng)的鏈置換能力，適用于多種等溫擴(kuò)增反應(yīng)，這些反應(yīng)通常在50-68°C之間進(jìn)行，比較好反應(yīng)溫度為65°C。2.**快速測序**：由于其高聚合酶活性，BstDNAPolymerase,LargeFragment可以用于快速測序，特別是對于高GC含量的DNA模板或微量（納克量級）DNA模板的測序。3.**全基因組擴(kuò)增**：BstDNAPolymerase,LargeFragment也可用于全基因組擴(kuò)增（WGA），這是一種在不需要熱循環(huán)儀的情況下擴(kuò)增整個基因組DNA的技術(shù)。4.**高dUTP耐受性**：與BstDNAPolymerase2.0相比，BstDNAPolymerase,LargeFragment在進(jìn)行等溫擴(kuò)增時不具有將dUTP摻入合成的DNA鏈的能力，這使得它在某些應(yīng)用中更具優(yōu)勢。Pfu DNA Polymerase 具有3'-5'外切酶活性，能夠識別并切除錯配的核苷酸，進(jìn)一步提高擴(kuò)增的準(zhǔn)確性。Pressinoic Acid

磁珠法提取的DNA通常指的是通過磁珠吸附技術(shù)從樣本中純化得到的核酸，而基因組DNA（gDNA）是指一個生物體細(xì)胞核中包含的全套遺傳信息的DNA。兩者的主要區(qū)別在于：1.**來源和組成**：-磁珠法提取的DNA可以是基因組DNA，也可以是質(zhì)粒DNA、線粒體DNA等其他類型的DNA。它是一個廣的概念，指的是通過磁珠法技術(shù)提取的任何類型的DNA。-基因組DNA特指一個生物體細(xì)胞核中的DNA，包含了所有的基因信息，以及可能的非編碼區(qū)域。它通常包含了大量的堿基對，如人類基因組由大約30億個堿基對組成。2.**純度和應(yīng)用**：-磁珠法提取的DNA的純度和質(zhì)量取決于提取過程中的裂解、吸附、洗滌和洗脫步驟，以及磁珠的質(zhì)量和操作條件。高質(zhì)量的磁珠法提取的DNA可以用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如PCR、克隆、測序等。-基因組DNA的提取通常需要考慮其完整性和純度，以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。基因組DNA提取的難點(diǎn)在于血液樣本成分復(fù)雜，且白細(xì)胞體積占比低，因此提取純化難度較高。3.**提取方法**：-磁珠法提取DNA是一種高效、快速的核酸提取技術(shù)，它利用磁珠表面修飾的特定官能團(tuán)與核酸的特異性結(jié)合，通過外加磁場實(shí)現(xiàn)核酸與雜質(zhì)的快速分離。Recombinant Human TFF3其作用位點(diǎn)相對局限，主要作用于高甘露糖型和部分雜合型 N - 連接糖鏈，對于復(fù)雜型 N - 連接糖鏈的作用較弱。

Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個步驟：1.**識別與結(jié)合**：-Cre重組酶首先識別并分別結(jié)合兩個LoxP序列的兩個反向重復(fù)序列，形成一個二聚體。2.**四聚體形成**：-兩個二聚體互相靠近，形成由四個Cre分子與兩個LoxP位點(diǎn)結(jié)合形成的四聚體復(fù)合物。3.**DNA切割與交換**：-Cre重組酶在每個LoxP位點(diǎn)的間隔序列中引導(dǎo)單鏈切割，產(chǎn)生帶有3’端羥基的斷裂。每個LoxP位點(diǎn)的兩個單鏈分別被切割。切割產(chǎn)生的自由3’端與對側(cè)的3’端進(jìn)行交換和重連，形成Holliday交叉結(jié)構(gòu)。4.**分子重組與解旋**：-Holliday交叉結(jié)構(gòu)通過Cre酶的作用被解旋并重組，形成新的重組產(chǎn)物。這個過程導(dǎo)致兩個LoxP位點(diǎn)之間的DNA序列被刪除、反轉(zhuǎn)或易位，具體效果取決于LoxP序列的排列方式（方向和位置）。5.**條件性基因編輯**：-通過建立特異性Cre小鼠，該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動子驅(qū)動，可在特定細(xì)胞或組織或全身表達(dá)Cre重組酶。與帶有Lox位點(diǎn)的Flox小鼠雜交，子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠，實(shí)現(xiàn)條件性基因打靶（表達(dá)或敲除靶基因）。

核酸內(nèi)切酶VIII（EndonucleaseVIII）是一種來自大腸桿菌的DNA損傷修復(fù)酶，具有以下特點(diǎn)：1.**雙功能活性**：核酸內(nèi)切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**釋放受損嘧啶堿基**：N-糖基化酶活性可以釋放雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，生成一個脫嘌呤(apurinic,AP)位點(diǎn)。3.**切割A(yù)P位點(diǎn)**：AP裂解酶活性可以切割A(yù)P位點(diǎn)的3'和5'端，產(chǎn)生一個具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。4.**識別并切除受損堿基**：核酸內(nèi)切酶VIII可以識別并切除多種受損堿基，包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內(nèi)酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲。5.**與EndonucleaseIII的區(qū)別**：雖然核酸內(nèi)切酶VIII與核酸內(nèi)切酶III相似，但核酸內(nèi)切酶VIII具有β和δ裂解酶活性，而核酸內(nèi)切酶III具有β裂解酶活性。6.**應(yīng)用領(lǐng)域**：核酸內(nèi)切酶VIII可以應(yīng)用于單細(xì)胞凝膠電泳、NGS建庫中DNA損傷修復(fù)、酶法合成DNA中釋放DNA鏈、堿洗脫，搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)進(jìn)行含U片段的克隆等。

牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）與細(xì)菌DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶的主要區(qū)別如下：1.**來源不同**：-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I來源于牛痘病毒，是一種真核生物病毒中的酶。-細(xì)菌DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶則來源于原核生物，如大腸桿菌的ω蛋白等。2.**功能特性**：-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I能夠解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)，并且識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT]，與DNA形成共價連接形成穩(wěn)定復(fù)合物，遇到DNA的5’-OH基團(tuán)后，重新連接形成完整DNA鏈。-細(xì)菌DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶，如大腸桿菌的ω蛋白，主要功能是催化DNA鏈斷開和結(jié)合的偶聯(lián)反應(yīng)，以改變DNA的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)。3.**活性條件**：-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I即使在Mg2+不存在的條件下也顯示活性。-細(xì)菌DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶可能需要Mg2+等金屬離子作為輔因子來發(fā)揮活性。4.**作用的DNA鏈**：-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I能使正負(fù)兩方的超螺旋分子均形成松散型。-原核生物由來的DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I只作用負(fù)鏈的超螺旋分子。5.**共價鍵形成**：-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I與DNA形成共價連接，此酯鍵中所貯存的能量可能在切斷端的再結(jié)合上起著作用。-細(xì)菌DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶在原核生物中是游離型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端與酶形成共價鍵。

Endo H 的活性受 pH 值的強(qiáng)烈影響，通常在酸性條件下表現(xiàn)出好的活性，一般合適 pH 范圍在 5.0-6.0 左右。Recombinant Cynomolgus IL-1R3/IL-1 RAcP Protein,His Tag

FnCas12a產(chǎn)品不含DNA內(nèi)切酶和外切酶，也不含RNA酶，保證了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。Pressinoic Acid

蛋白A-微球菌核酸酶（pA-MNase）是一種特殊的融合蛋白，它結(jié)合了蛋白A和微球菌核酸酶（MNase，MicrococcalNuclease）的特性。以下是pA-MNase的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用：1.**融合表達(dá)產(chǎn)物**：pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達(dá)產(chǎn)物，因此它同時具有ProteinA的抗體結(jié)合活性和MNase的核酸內(nèi)切酶活性。2.**雙重功能**：由于其雙重功能，pA-MNase常用于蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究，特別是在ChIC（ChromatinImmunocleavage）和CUT&RUN（CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease）技術(shù)中。3.**ProteinA的特性**：ProteinA是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的細(xì)胞壁表面蛋白，分子量為42kDa，能特異性地與哺乳動物免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）結(jié)合，通常結(jié)合部位為免疫球蛋白的Fc區(qū)。4.**微球菌核酸酶（MNase）的特性**：MNase是一種核酸內(nèi)切酶，能夠降解核酸，常用于降解蛋白質(zhì)制備中存在的核酸，減少細(xì)胞裂解液的粘度，以及用于染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析和快速RNA測序。5.**反應(yīng)條件**：MNase的反應(yīng)條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer，需要補(bǔ)充100μg/ml重組白蛋白，分子生物學(xué)級，并在37°C下孵化。Pressinoic Acid