蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一種特殊的融合蛋白,它結合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些關鍵特點和應用:1.**融合表達產物**:pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達產物,因此它同時具有ProteinA的抗體結合活性和MNase的核酸內切酶活性。2.**雙重功能**:由于其雙重功能,pA-MNase常用于蛋白質-DNA相互作用研究,特別是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技術中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一種發現于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的細胞壁表面蛋白,分子量為42kDa,能特異性地與哺乳動物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)結合,通常結合部位為免疫球蛋白的Fc區。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一種核酸內切酶,能夠降解核酸,常用于降解蛋白質制備中存在的核酸,減少細胞裂解液的粘度,以及用于染色質結構分析和快速RNA測序。5.**反應條件**:MNase的反應條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要補充100μg/ml重組白蛋白,分子生物學級,并在37°C下孵化。UBE2L3與其他E2酶的區別在于它具有特定的結構特征,它包含一個高度保守的UBC結構域,這是E2酶家族的標志。Recombinant Human CD96/TACTILE Protein,mFc Tag
提取的病毒核酸可以直接用于多種實驗,主要包括:1.**實時熒光定量PCR(qPCR)**:這是一種常用的技術,可以對病毒核酸進行定量檢測。它通過實時監測PCR過程中的熒光信號來確定病毒核酸的數量。例如,病毒核酸檢測就是基于此技術,通過設計特異性引物和探針,對病毒的靶基因進行定性檢測。2.**逆轉錄PCR(RT-PCR)**:這項技術用于檢測RNA病毒,通過將病毒RNA逆轉錄成cDNA,然后進行PCR擴增,以檢測病毒的存在。RT-PCR技術靈敏而且用途廣,可以用于檢測細胞、組織中RNA病毒的含量。3.**等溫擴增法**:包括環介導的等溫擴增(LAMP)和切口延伸等溫擴增(NEAR),這些方法在恒溫條件下進行,無需復雜的設備,適用于快速、現場的病毒核酸檢測。4.**數字PCR(dPCR)**:這是一種高度靈敏的技術,可以對病毒核酸進行定量。它通過將樣本分配到成千上萬的微小反應室中,每個反應室單獨進行PCR擴增,從而實現對病毒核酸的精確計數。5.**核酸雜交技術**:如熒光原位雜交(FISH),可以用于檢測特定病毒核酸序列在細胞或組織中的存在和定位。Recombinant Human PLA2G1B Protein,hFc TagE1通常被認為是泛素化過程中的限速步驟,因為它涉及到泛素的激起和ATP的水解。
BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶在分子生物學實驗中都是常用的酶,但它們之間存在一些關鍵的不同點:1.**來源和熱穩定性**:-**TaqDNA聚合酶**來源于嗜熱菌Thermusaquaticus,具有很好的耐熱性,能夠承受PCR的熱變性步驟。-**BstDNA聚合酶**來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus),同樣具有較高的熱穩定性,適用于等溫擴增,如LAMP技術,無需PCR熱循環。2.**酶活性**:-**TaqDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和5'-3'外切酶活性,但沒有3'-5'外切酶活性。這意味著它在DNA合成過程中可以校正一些錯誤,但保真性相對較低。-**BstDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和強鏈置換活性,但缺乏5'-3'外切酶活性。這使得它在等溫擴增中更為有效,尤其是在需要高保真度和快速擴增的應用中。3.**應用領域**:-**TaqDNA聚合酶**主要用于PCR技術,適用于各種DNA片段的擴增,包括復雜模板和長片段的擴增。-**BstDNA聚合酶**特別適用于等溫擴增技術,如LAMP,這些技術不需要溫度循環,適用于快速、低成本的DNA擴增。4.**擴增速度和效率**:-**BstDNA聚合酶**在等溫擴增中顯示出比傳統TaqDNA聚合酶更快的擴增速度和更高的產量,尤其是在優化的LAMP反應中。
BloodGenomicDNAIsolationKitwithMagneticBeads是一種利用磁珠技術從血液中提取基因組DNA的試劑盒。以下是一些關鍵特點和應用:1.**高效提取**:該試劑盒采用特殊的磁珠和緩沖體系,能夠快速且高效地從100μl至1ml的血液中分離和純化高質量的基因組DNA。2.**磁珠特性**:獨特的磁珠具有很強的核酸親和力,在特定條件下可以快速分離和純化核酸。這些磁珠對磁場響應迅速,使得提取過程既安全又便捷。3.**提取過程**:血液樣本在裂解液和蛋白酶K的作用下迅速裂解,釋放出的基因組DNA與磁珠特異性結合。通過磁分離架的作用,磁珠與溶液快速分離,經過洗滌去除雜質,用洗脫液將基因組DNA從磁珠上洗脫下來。4.**應用廣**:提取的基因組DNA可用于多種分子生物學實驗,如PCR擴增、酶切、基因分型、Southern雜交、高通量測序、基因組DNA文庫構建等。5.**操作簡便**:整個抽提過程大約需要50分鐘,操作簡便,無需使用有毒有害的有機試劑,如酚或氯仿,提高了實驗的安全性。6.**高純度和高回收率**:提取的DNA純度高,A260/A280通常在1.7-1.9之間,表明蛋白和RNA的污染低。回收率通常超過80%。
pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實驗中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質-DNA相互作用的技術,pA-MNase在此技術中用于在免疫沉淀后切割染色質DNA,以分析特定蛋白質與DNA的結合位點。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質-基因組互作研究技術,pA-MNase在此技術中用于在目標蛋白質被抗體識別后,通過核酸酶活性切割附近的DNA,從而釋放與目標蛋白質相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術相比傳統的ChIP-Seq具有實驗周期短、信噪比高、可重復性好以及細胞投入量低的優勢,尤其適用于早期胚胎發育、干細胞、**以及表觀遺傳學等研究領域。3.**染色質免疫沉淀實驗**:pA-MNase在染色質免疫沉淀實驗中用于染色質片段化,它在核小體間DNAlinker上進行切割保持了核小體的完整性,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過程中染色質乳化所帶來的負面影響。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細胞裂解液中的核酸,以減少樣品的粘度,這對于后續的蛋白質分析實驗尤為重要。
Pfu DNA Polymerase在基因組測序中的應用:Pfu DNA Polymerase用于基因組測序,確保測序結果的準確性。Recombinant Human CD96/TACTILE Protein,mFc Tag
核酸內切酶VIII(EndonucleaseVIII)和核酸內切酶III(EndonucleaseIII)都是DNA修復酶,但它們之間存在一些關鍵的區別:1.**活性類型**:-**核酸內切酶VIII**:具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。N-糖基化酶活性可以釋放受損的嘧啶堿基,如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇,產生一個脫嘌呤(Apurinic,AP)位點;AP裂解酶活性可以切割AP位點的3'和5'端,產生一個具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。-**核酸內切酶III**:主要具有β裂解酶(β-lyase)活性,能夠切割DNA磷二酯骨架在AP位點處,但不具備δ裂解酶(δ-lyase)活性。2.**識別和切除的受損堿基**:-**核酸內切酶VIII**:可以識別并切除包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲在內的多種受損堿基。-**核酸內切酶III**:主要識別和切除氧化性損傷的嘌呤堿基,如8-氧鳥嘌呤。3.**裂解酶活性**:-**核酸內切酶VIII**:具有β和δ裂解酶活性,而**核酸內切酶III**具有β裂解酶活性。這些區別決定了它們在DNA損傷修復中的作用和應用范圍。
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin