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Recombinant Biotinylated Human RGMa Protein

來源: 發布時間:2025年02月12日

BstDNA聚合酶在等溫擴增中的優勢主要包括以下幾點:1.**高靈敏度和擴增效率**:BstDNA聚合酶具有鏈置換能力,能夠在恒溫條件下快速、高效、特異性地擴增模板。翌圣生物的BstPlusDNAPolymerase靈敏度超高,低至5copies目的基因可測,且始終能比競品更快達到閾值,擴增速率更快。2.**高dUTP耐受性**:BstPlusDNAPolymerase具有較高的dUTP耐受性,在反應體系中添加dUTP對BstPlusDNAPolymerase的靈敏度及擴增效率無影響,這使得它在防污染系統中表現出色。3.**快速擴增**:使用BstDNA聚合酶的等溫擴增技術,如LAMP,可以在15-60分鐘內實現109-1010倍的擴增,顯示出快速的擴增能力。4.**熱穩定性**:BstDNA聚合酶具有較強的熱穩定性,能在60-65℃的恒溫條件下保持活性,這使得它非常適合于不需要溫度循環的等溫擴增技術。5.**簡化的反應設置**:Bst3.0DNAPolymerase優化了Loop-MediatedIsothermalDNAAmplification(LAMP)反應,簡化了反應設置,可以實現單酶RT-LAMP反應。6.**抗抑制劑能力強**:Bst3.0DNAPolymerase即使在高濃度的擴增抑制劑中,包括dUTP,也能展現出強大的性能。

Tn5 轉座酶可用于多種生物體,包括許多革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌以及酵母等。Recombinant Biotinylated Human RGMa Protein,His-Avi Tag

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Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease,簡稱λExonuclease)是一種具有特定特性和應用的酶,以下是其主要特點和應用:1.**特異性作用**:λExonuclease是一種5'→3'核酸外切酶,能選擇性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。2.**酶切活性**:對單鏈DNA和5'端未磷酸化修飾的DNA的酶切活性較低,不能從DNA的切刻或缺口處起始消化。3.**嗜磷酸性**:該酶具有非常強的嗜磷酸性,磷酸化的核酸鏈與非磷酸化的核酸鏈的切割效率相差達200倍以上。4.**切割效率**:Lambda核酸外切酶是一種具有高度持續性的堿性核酸外切酶,可以連續地將核酸切割成為單個堿基,切割比較高速率可以達到1000nt/S。5.**應用領域**:-生成單鏈PCR產物用于DNA測序。-DNA單鏈構象多態性(SSCP)分析。-滾環擴增。-從雙鏈DNA片段生成單鏈DNA。-PCR產物的克隆。-質粒制備凈化。6.**酶活性定義**:Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoproduce10nmolofacid-solubledeoxyribonucleotidefromdouble-strandedsubstrateinatotalreactionvolumeof50μlin30minutesat37oCin1XLambdaExonucleaseReactionBufferwith1μgsonicatedduplex[3H]-DNA。Recombinant Human RGMa Protein,His-Avi TagOne Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種用于實時熒光定量PCR的試劑盒,它結合了反轉錄和PCR擴增步驟。

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質粒DNA提取后的儲存條件對于保持其活性至關重要。以下是一些推薦的儲存方法:1.**干燥保存**:質粒DNA以干粉狀態保存是比較好的方法。如果總DNA以溶液形式保存,可以使用1×TE緩沖液稀釋,且TE緩沖液的pH值應為8.0-8.5之間。2.**低溫保存**:植物總DNA低溫保存比較好在-80℃以下或液氮保存。如果沒有條件,也可以在-20℃保存。總DNA應避免經常凍融,同時建議每份樣品保存3-5個樣本。總DNA提取后保存的時限通常較組織要長(>兩年),但若長期保存,每隔兩年應抽測,對不符合使用要求的DNA進行更新。3.**避免反復凍融**:反復凍融會破壞DNA的完整性和活性,因此應盡量避免。4.**使用保護劑**:化學添加劑如二甲基亞砜(DMSO)可以防止DNA單鏈斷裂,但因其毒性和使用量的問題,并不是理想的保護劑。5.**封裝技術**:通過封裝技術保存DNA,可以隔絕外界水、氧氣和光等可能影響DNA穩定的因素。例如,DNAshell®技術基于密封的不銹鋼微型膠囊,在惰性氣氛下,給予DNA干粉保護。6.**使用穩定劑**:一些天然的雙糖,如海藻糖,被認為是一種多功能的保護劑,可以保護生物體免受冷凍、加熱等不利條件的影響。

在PCR實驗中,除了BsuDNAPolymerase,還有幾種聚合酶適合高溫擴增,包括:1.**TaqDNAPolymerase**:這是常用的PCR聚合酶,來源于Thermusaquaticus,能夠在72°C的比較好活性溫度下工作。它具有良好的熱穩定性,可以承受PCR的熱變性步驟,且中途不需要再添加酶。2.**PfuDNAPolymerase**:來源于Pyrococcusfuriosus,具有出色的熱穩定性和3'→5'外切酶活性,提供校正功能,適用于對PCR保真性要求較高的實驗,如基因篩選、克隆表達、突變檢測、定點突變等。3.**VentDNAPolymerase**:來源于Litoralis棲熱球菌,具有3'→5'外切酶活性,可以去除錯配的堿基,具有校對功能,保真度比TaqDNAPolymerase高5~15倍。4.**KODDNAPolymerase**:來自Thermococcuskodakaraensis,具有高保真性和高熱穩定性,保真性比PfuDNAPolymerase更高,優化后的PCR反應緩沖液能使得其擴增速度達到Taq酶的2倍、Pfu酶的5-6倍。5.**BstDNAPolymerase**:來源于Bacillusstearothermophilus,具有3'到5'外切割活性,適用于等溫擴增反應,如LAMP技術,可在恒溫下進行DNA擴增,無需繁瑣的溫度循環。Pfu DNA Polymerase在基因克隆中的應用:Pfu DNA Polymerase常用于基因克隆,確保DNA片段的高精度復制。

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Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在PCR產物的克隆中主要應用在以下幾個方面:1.**單鏈DNA的生成**:-Lambda核酸外切酶可以用于從雙鏈DNA中生成單鏈DNA。由于該酶沿5'→3'方向逐步切去5'單核苷酸,底物是5'磷酸化的雙鏈DNA,因此可以用來消化PCR產物中的一條鏈,從而生成單鏈DNA,這對于某些克隆技術來說是必要的步驟。2.**PCR產物的克隆**:-在克隆過程中,有時需要將PCR產物的5'端磷酸化,以便與載體連接。Lambda核酸外切酶可以消化非磷酸化的DNA,從而在一定程度上幫助準備適合克隆的PCR產物。3.**減少自身環化和非特異性連接**:-在連接反應中,為了減少質粒載體的自身環化,可以使用堿性磷酸酶處理質粒DNA以去除5'磷酸基團。而Lambda核酸外切酶可以消化5'端磷酸化的DNA,因此在某些情況下,它可以輔助減少PCR產物的自身環化,尤其是在PCR產物和質粒載體的連接反應中。4.**提高克隆效率**:-通過消化PCR產物中的一條鏈,Lambda核酸外切酶可以幫助減少PCR產物的非特異性連接,從而提高克隆的效率和準確性。綜上所述,Lambda核酸外切酶在PCR產物的克隆中主要通過生成單鏈DNA、準備適合克隆的PCR產物、減少自身環化和非特異性連接以及提高克隆效率等方面發揮作用。Cas9 NLS與CRISPR/Cas9系統中的gRNA兼容,可以進行位點特異性的DNA切割 。Recombinant Human SLAMF1/SLAM/CD150 Protein,His Tag

與一些其他 DNA 聚合酶不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5’→3’外切酶活性,不會對 DNA 鏈的 5’端進行切割和修飾。Recombinant Biotinylated Human RGMa Protein,His-Avi Tag

嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶I(BstDNAPolymeraseI)是一種熱穩定的酶,它在高溫下(55-65°C)仍然保持活性,這使得它在分子生物學實驗中非常有用,尤其是在需要高溫反應的實驗中,如熱循環擴增(PCR)。BstDNAPolymeraseI具有以下特性:1.**熱穩定性**:BstDNAPolymeraseI在高溫下具有較高的穩定性,適用于高溫反應的實驗,如PCR。2.**3'到5'外切酶活性**:這種酶具有3'到5'外切酶活性,能夠切除DNA末端上的非特異性引物和雜交DNA,使其成為等溫擴增應用的理想酶。3.**耐鹽性**:BstDNAPolymeraseI在高鹽條件下仍能保持穩定活性,這在一些特殊的PCR應用中非常有用。4.**等溫擴增**:由于其3'到5'外切酶活性,BstDNAPolymeraseI用于等溫擴增反應,如LAMP技術,這種技術能夠在恒溫下進行DNA擴增,無需繁瑣的溫度循環。5.**快速PCR**:由于其高溫穩定性,BstDNAPolymeraseI也可用于快速PCR反應,縮短了實驗時間。6.**高GC含量模板擴增**:BstDNAPolymeraseI對高GC含量模板的擴增效果較好,因此在一些難擴增的模板中表現出色。Recombinant Biotinylated Human RGMa Protein,His-Avi Tag

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