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Recombinant Mouse B2M/beta 2-Microglobulin Protein

來源: 發布時間:2025年02月20日

T7EndonucleaseI(T7EI)是一種特殊的DNA內切酶,具有以下特點:1.**識別錯配DNA**:T7EI能夠識別并切割不完全配對的DNA、十字型結構DNA、Holliday結構或交叉DNA以及異源雙鏈DNA。2.**切割位點**:T7EI切割錯配位點5'端的、第二或第三個磷酸二酯鍵。3.**靈敏度**:T7EI對錯配DNA的識別非常靈敏,能夠檢測并切割單堿基和多堿基的錯配。4.**應用**:T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因編輯技術導致的基因突變的鑒定。它通過識別錯配DNA來幫助鑒定基因編輯是否成功以及是否有非目標效應。5.**直接電泳檢測**:T7EI的產物可以直接通過電泳進行檢測,這使得它在實驗操作中更為方便。6.**來源**:T7EI來源于大腸桿菌菌株,是一種麥芽糖結合蛋白(MBP)和T7核酸內切酶I(T7EI)的融合蛋白。7.**成本效益**:盡管T7EI在商業上使用時成本較高,但它在大規模樣本測試中,尤其是在基因突變鑒定方面,提供了一種有效的篩選方法。8.**特殊注意事項**:T7EI能夠識別長度大于或等于2bp的插入、缺失或突變導致的錯配DNA,但不能識別1bp的插入、缺失或突變。這些特點使得T7EndonucleaseI成為基因突變鑒定中一個非常有用的工具,尤其是在CRISPR/Cas9等基因編輯技術的應用中。與一些其他 DNA 聚合酶不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5’→3’外切酶活性,不會對 DNA 鏈的 5’端進行切割和修飾。Recombinant Mouse B2M/beta 2-Microglobulin Protein,hFc Tag

Recombinant Mouse B2M/beta 2-Microglobulin Protein,hFc Tag,標準物質

磁珠法在基因克隆中的應用主要體現在以下幾個方面:1.**質粒DNA的提取**:磁珠法可以用于從細菌細胞中提取質粒DNA,這對于質粒的克隆和表達至關重要。通過磁珠法提取的質粒DNA純度高,適合用于后續的酶切、連接、轉化等分子克隆步驟。2.**基因組DNA的提取**:磁珠法可以用于從各種生物樣本中提取基因組DNA,這對于基因組的克隆和分析非常重要。提取的基因組DNA可以用于PCR擴增、基因表達分析、基因突變檢測等。3.**mRNA的提取和純化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和純化mRNA,這對于cDNA的合成和基因表達分析非常關鍵。磁珠法提取的mRNA純度高,可以用于后續的cDNA合成和RT-PCR等實驗。4.**PCR產物的純化**:磁珠法可以用于純化PCR產物,去除反應中的酶、dNTPs和其他雜質,為克隆PCR產物提供高純度的DNA模板。5.**DNA片段的篩選和回收**:在基因克隆過程中,可能需要從多個DNA片段中篩選出特定大小或序列的片段。磁珠法可以用于DNA片段的篩選和回收,提高克隆效率。6.**自動化和高通量操作**:磁珠法易于與自動化設備結合,適合高通量樣本處理,這對于大規模基因克隆項目尤為重要。自動化操作減少了人為操作誤差,提高了實驗的重復性和可靠性。Recombinant Cynomolgus RGM-C Protein,His TagEndo H 的活性受 pH 值的強烈影響,通常在酸性條件下表現出好的活性,一般合適 pH 范圍在 5.0-6.0 左右。

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pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實驗中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質-DNA相互作用的技術,pA-MNase在此技術中用于在免疫沉淀后切割染色質DNA,以分析特定蛋白質與DNA的結合位點。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質-基因組互作研究技術,pA-MNase在此技術中用于在目標蛋白質被抗體識別后,通過核酸酶活性切割附近的DNA,從而釋放與目標蛋白質相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術相比傳統的ChIP-Seq具有實驗周期短、信噪比高、可重復性好以及細胞投入量低的優勢,尤其適用于早期胚胎發育、干細胞、**以及表觀遺傳學等研究領域。3.**染色質免疫沉淀實驗**:pA-MNase在染色質免疫沉淀實驗中用于染色質片段化,它在核小體間DNAlinker上進行切割保持了核小體的完整性,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過程中染色質乳化所帶來的負面影響。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細胞裂解液中的核酸,以減少樣品的粘度,這對于后續的蛋白質分析實驗尤為重要。

Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個步驟:1.**識別與結合**:-Cre重組酶首先識別并分別結合兩個LoxP序列的兩個反向重復序列,形成一個二聚體。2.**四聚體形成**:-兩個二聚體互相靠近,形成由四個Cre分子與兩個LoxP位點結合形成的四聚體復合物。3.**DNA切割與交換**:-Cre重組酶在每個LoxP位點的間隔序列中引導單鏈切割,產生帶有3’端羥基的斷裂。每個LoxP位點的兩個單鏈分別被切割。切割產生的自由3’端與對側的3’端進行交換和重連,形成Holliday交叉結構。4.**分子重組與解旋**:-Holliday交叉結構通過Cre酶的作用被解旋并重組,形成新的重組產物。這個過程導致兩個LoxP位點之間的DNA序列被刪除、反轉或易位,具體效果取決于LoxP序列的排列方式(方向和位置)。5.**條件性基因編輯**:-通過建立特異性Cre小鼠,該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動子驅動,可在特定細胞或組織或全身表達Cre重組酶。與帶有Lox位點的Flox小鼠雜交,子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠,實現條件性基因打靶(表達或敲除靶基因)。去泛素化酶可以去除泛素化標記,這一步驟是泛素化過程的逆轉過程,它允許細胞對泛素化事件進行精細調控。

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蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一種特殊的融合蛋白,它結合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些關鍵特點和應用:1.**融合表達產物**:pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達產物,因此它同時具有ProteinA的抗體結合活性和MNase的核酸內切酶活性。2.**雙重功能**:由于其雙重功能,pA-MNase常用于蛋白質-DNA相互作用研究,特別是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技術中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一種發現于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的細胞壁表面蛋白,分子量為42kDa,能特異性地與哺乳動物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)結合,通常結合部位為免疫球蛋白的Fc區。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一種核酸內切酶,能夠降解核酸,常用于降解蛋白質制備中存在的核酸,減少細胞裂解液的粘度,以及用于染色質結構分析和快速RNA測序。5.**反應條件**:MNase的反應條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要補充100μg/ml重組白蛋白,分子生物學級,并在37°C下孵化。將含有重組質粒的表達載體轉化到宿主細胞中,通常是大腸桿菌或其他合適的細胞系。Recombinant Mouse ASPH Protein,His Tag

Hifair? Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit :適用于從總RNA或mRNA模板合成鏈cDNA,具有高熱穩定性。Recombinant Mouse B2M/beta 2-Microglobulin Protein,hFc Tag

Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關鍵信息:來源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫擴增反應,如LAMP和CPA等。應用:主要應用于等溫DNA擴增,包括環介導等溫擴增(LAMP)和其他等溫擴增技術。規格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。產品形式:提供的產品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),貨號14402ES,以及凍干粉形式的產品,貨號14405ES,不含甘油。靈敏度和穩定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,低至5copies目的基因可測,且在飛克(fg)級別的模板量下也能快速達到閾值。在37°C下,該酶可以保持相對穩定的效應長達5天,并且在-20℃下可以穩定保存2年。儲存條件:建議在-25℃至-15℃下儲存,以保持產品活性,并避免反復凍融。Recombinant Mouse B2M/beta 2-Microglobulin Protein,hFc Tag

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