T5核酸外切酶在基因克隆中的優勢主要體現在以下幾個方面：1.**高效性**：T5核酸外切酶依賴性組裝（TEDA）方法在常規克隆中的效率與使用專有DNA聚合酶的商業In-Fusion方法相似，但高于使用T5核酸外切酶、PhusionDNA聚合酶和DNA連接酶的Gibson方法。2.**低成本**：TEDA方法每個反應使用0.04U的T5核酸外切酶，價格為0.25美分，具有很高的成本效益。3.**簡單性**：TEDA方法的反應混合物非常簡單，易于操作，這使得它在預算有限的實驗室中尤其有用。4.**靈活性**：TEDA方法能夠組裝多個DNA片段，并在多個位點同時進行定點誘變，提供了一種靈活的克隆和突變方法。5.**陽性克隆率**：使用T5核酸外切酶的無縫克隆技術可以確保100%的陽性克隆率，這提高了實驗的成功率。6.**協同作用**：在無縫克隆中，T5核酸外切酶與Phusion高保真DNA聚合酶和TaqDNA連接酶協同作用，通過切割、填補和連接三個步驟，高效地完成DNA片段的連接。7.**減少污染**：T5核酸外切酶可以降解堿裂解提取質粒中的變性DNA，減少超螺旋DNA的污染，提高DNA克隆和轉染效率。這些優勢使得T5核酸外切酶成為基因克隆中一個非常有價值的工具，尤其是在需要高效、低成本和操作簡便的實驗環境中。Pfu DNA Polymerase的熱穩定性：Pfu DNA Polymerase在高溫下仍保持活性，適合高溫PCR反應。Recombinant Human HGF Protein

牛痘DNA拓撲異構酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）與細菌DNA拓撲異構酶的主要區別如下：1.**來源不同**：-牛痘DNA拓撲異構酶I來源于牛痘病毒，是一種真核生物病毒中的酶。-細菌DNA拓撲異構酶則來源于原核生物，如大腸桿菌的ω蛋白等。2.**功能特性**：-牛痘DNA拓撲異構酶I能夠解旋DNA的超螺旋結構，并且識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT]，與DNA形成共價連接形成穩定復合物，遇到DNA的5’-OH基團后，重新連接形成完整DNA鏈。-細菌DNA拓撲異構酶，如大腸桿菌的ω蛋白，主要功能是催化DNA鏈斷開和結合的偶聯反應，以改變DNA的拓撲結構。3.**活性條件**：-牛痘DNA拓撲異構酶I即使在Mg2+不存在的條件下也顯示活性。-細菌DNA拓撲異構酶可能需要Mg2+等金屬離子作為輔因子來發揮活性。4.**作用的DNA鏈**：-牛痘DNA拓撲異構酶I能使正負兩方的超螺旋分子均形成松散型。-原核生物由來的DNA拓撲異構酶I只作用負鏈的超螺旋分子。5.**共價鍵形成**：-牛痘DNA拓撲異構酶I與DNA形成共價連接，此酯鍵中所貯存的能量可能在切斷端的再結合上起著作用。-細菌DNA拓撲異構酶在原核生物中是游離型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端與酶形成共價鍵。

Recombinant Human TWEAK Receptor/TNFRSF12APfu DNA Polymerase在基因克隆中的應用：Pfu DNA Polymerase常用于基因克隆，確保DNA片段的高精度復制。

核酸內切酶VIII（EndonucleaseVIII）和核酸內切酶III（EndonucleaseIII）都是DNA修復酶，但它們之間存在一些關鍵的區別：1.**活性類型**：-**核酸內切酶VIII**：具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。N-糖基化酶活性可以釋放受損的嘧啶堿基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，產生一個脫嘌呤(Apurinic,AP)位點；AP裂解酶活性可以切割AP位點的3'和5'端，產生一個具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。-**核酸內切酶III**：主要具有β裂解酶(β-lyase)活性，能夠切割DNA磷二酯骨架在AP位點處，但不具備δ裂解酶(δ-lyase)活性。2.**識別和切除的受損堿基**：-**核酸內切酶VIII**：可以識別并切除包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲在內的多種受損堿基。-**核酸內切酶III**：主要識別和切除氧化性損傷的嘌呤堿基，如8-氧鳥嘌呤。3.**裂解酶活性**：-**核酸內切酶VIII**：具有β和δ裂解酶活性，而**核酸內切酶III**具有β裂解酶活性。這些區別決定了它們在DNA損傷修復中的作用和應用范圍。

牛痘DNA拓撲異構酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）是一種來源于牛痘病毒的I型真核拓撲異構酶，具有以下功能和應用：1.**功能**：-牛痘DNA拓撲異構酶I可以催化雙鏈DNA分子中單鏈DNA特定序列位置的磷酸二酯鍵的斷開和連接。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性，能夠通過快速的酶切和連接使雙鏈共價閉合環狀的正或負超螺旋DNA發生解超螺旋，形成含有較少的正或負超螺旋的雙鏈環狀DNA分子。-能夠使雙鏈DNA形成繩結(knotting)或解開繩結(unknotting)，聯結互補的單鏈環狀DNA成為雙鏈環狀DNA。2.**應用**：-作為一種DNA重組連接的新型工具酶，用于DNA載體和重組片段的連接、缺刻修復、接頭連接等。-適用于TOPO克隆載體的制備、NGS建庫中的接頭連接等。-在TOPO克隆技術中，DNA拓撲異構酶I同時具有限制酶和連接酶特性，其生物學功能是在復制期間切割并重新連接DNA。3.**使用方法**：-用于DNA快速酶切流程，包括配制體系反應液、輕柔混勻、37℃孵育15分鐘等步驟。4.**儲存條件**：-建議在-25～-15℃保存，有效期為3年。5.**注意事項**：-避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作，以防止酶失活。牛痘DNA拓撲異構酶I因其獨特的功能，在分子生物學研究和基因工程中扮演著重要的角色。泛素連接酶E3識別特定的靶蛋白，并促進E2上的泛素轉移到靶蛋白的賴氨酸殘基上，形成泛素化標記。

在現代分子生物學研究中，實時熒光定量PCR（qPCR）技術已成為基因表達分析、病原體檢測、基因拷貝數變異研究等領域的工具。而One Step RT-qPCR Probe Kit憑借其產品特點和性能，為科研工作者提供了一種高效、可靠的解決方案，極大地推動了相關研究的進展。一、產品特點（一）一步法操作One Step RT-qPCR Probe Kit采用獨特的一步法反應體系，將逆轉錄（RT）和qPCR反應集成在一個反應體系中。這種設計極大地簡化了實驗操作流程，減少了人為操作誤差和樣本污染的風險。相比傳統的兩步法，一步法節省了時間和人力成本，還提高了實驗的重復性和穩定性，尤其適合高通量樣本的檢測。（二）高靈敏度與特異性該試劑盒采用了先進的探針技術，結合優化的酶體系和反應緩沖液，能夠實現對低豐度靶標基因的高靈敏度檢測。其特異性探針設計確保了與目標序列結合，避免了非特異性擴增的干擾，從而為定量分析提供了準確可靠的數據支持。無論是對微量樣本中的基因表達進行定量，還是對低濃度病原體進行檢測，One Step RT-qPCR Probe Kit都能表現出性能。Ultra-Long DNA Polymerase是一種專為擴增超長DNA片段設計的聚合酶能夠擴增長達數十kb上百kb的DNA片段。Recombinant Rhesus macaque FGFR4 Protein,His Tag

Tn5 轉座酶的 DNA 結合元件分布在幾乎整個一級序列上，在與 DNA 結合時會使 DNA 發生彎曲。Recombinant Human HGF Protein

核酸內切酶VIII（EndonucleaseVIII）是一種來自大腸桿菌的DNA損傷修復酶，具有以下特點：1.**雙功能活性**：核酸內切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**釋放受損嘧啶堿基**：N-糖基化酶活性可以釋放雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，生成一個脫嘌呤(apurinic,AP)位點。3.**切割AP位點**：AP裂解酶活性可以切割AP位點的3'和5'端，產生一個具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。4.**識別并切除受損堿基**：核酸內切酶VIII可以識別并切除多種受損堿基，包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲。5.**與EndonucleaseIII的區別**：雖然核酸內切酶VIII與核酸內切酶III相似，但核酸內切酶VIII具有β和δ裂解酶活性，而核酸內切酶III具有β裂解酶活性。6.**應用領域**：核酸內切酶VIII可以應用于單細胞凝膠電泳、NGS建庫中DNA損傷修復、酶法合成DNA中釋放DNA鏈、堿洗脫，搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)進行含U片段的克隆等。