產品特點50× ROX Reference Dye的主要成分是高純度的5-ROX甘氨酸,其濃度為25 μM,以50倍濃縮的形式提供。這種染料的熒光強度在PCR過程中保持穩定,不會因擴增反應而發生變化,因此可以作為理想的內部參考信號。其激發波長為575 nm,發射波長為602 nm,與多數qPCR儀器的光學系統兼容。此外,ROX Reference Dye具有良好的化學穩定性,能夠在-20℃避光保存長達2年,短期使用時可在4℃保存。這種穩定性使其在實驗中能夠提供一致的熒光信號,減少因試劑變質導致的實驗誤差。性能優勢校正孔間誤差:qPCR實驗中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度等因素,不同孔之間的熒光信號可能存在差異。50× ROX Reference Dye能夠通過校正這些非PCR相關的變化,顯著提高定量的精確度。提高數據重現性:通過使用ROX染料對數據進行歸一化處理,實驗人員可以在較少的重復實驗中獲得更精確的結果,從而節省時間和資源。適用于多種儀器:50× ROX Reference Dye兼容多種主流qPCR儀器,如ABI 5700、7000、UDG在結構上屬于單功能DNA糖基化酶,它通過沿著DNA鏈滑動,識別尿嘧啶分子,進行堿基切除。Recombinant Biotinylated Human CD161 Protein,His-Avi Tag
牛痘DNA拓撲異構酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)在實驗室中的使用主要涉及以下幾個步驟:1.**DNA載體連接**:-牛痘DNA拓撲異構酶I可以用于DNA載體連接,特別是在TOPO克隆載體制備中。它能夠識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT],并與DNA形成共價連接形成穩定復合物,遇到DNA的5’-OH基團后,重新連接形成完整DNA鏈。2.**接頭連接**:-在NGS建庫中,牛痘DNA拓撲異構酶I可用于接頭連接。這包括將含有特定序列的接頭A和接頭B與酶一起孵育,以實現DNA片段的連接。3.**操作步驟**:-**質粒解旋**:將超螺旋質粒DNA與牛痘DNA拓撲異構酶I混合,在37°C下孵育5-15分鐘,以實現質粒的解旋。-**接頭連接**:將接頭A(含CCCTT序列)和接頭B(含5’OH)與牛痘DNA拓撲異構酶I混合,在37°C下孵育5-15分鐘,以實現接頭的連接。4.**注意事項**:-雙鏈接頭A通常5’端做NH2封閉修飾,以防止自連接;接頭A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴,再長的尾巴會導致連接效率大幅下降。-雙鏈接頭B的5’端必須包含-OH。-由于該酶應用廣,在不同的實驗中使用策略不同,需要靈活運用,并根據具體文獻進行調整。
Recombinant Cynomolgus IL-12B/p40/NKSF2 Protein,His Tag由于Pfu DNA Polymerase 對引物的質量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯誤導致的非目標突變。
一、主要特點:免提取與高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專為血液樣本設計的高效PCR預混液,能夠直接從全血或干血斑中擴增DNA,無需進行繁瑣的DNA提取和純化步驟。這種預混液含有高保真DNA聚合酶(如HemoTaq?或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase),這些酶經過優化,能夠耐受血液中的各種抑制劑,包括抗凝劑(如EDTA、肝素、檸檬酸鈉)和濾紙中的化學物質。此外,該預混液還具備的模板兼容性,能夠從多種抗凝劑保存的血液樣本中直接擴增DNA,適用于人類、小鼠等哺乳動物的全血樣本。二、性能:高保真性與長片段擴增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的優勢之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶,接近Pfu DNA聚合酶,能夠確保擴增產物的準確性。這對于需要高精度的基因克隆和測序實驗尤為重要。此外,該預混液能夠擴增長達5kb甚至更長的DNA片段,適用于多種復雜的基因組分析。例如,它可以輕松擴增人類基因組中的長片段,如IL-6基因的4882bp片段。
Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個步驟:1.**識別與結合**:-Cre重組酶首先識別并分別結合兩個LoxP序列的兩個反向重復序列,形成一個二聚體。2.**四聚體形成**:-兩個二聚體互相靠近,形成由四個Cre分子與兩個LoxP位點結合形成的四聚體復合物。3.**DNA切割與交換**:-Cre重組酶在每個LoxP位點的間隔序列中引導單鏈切割,產生帶有3’端羥基的斷裂。每個LoxP位點的兩個單鏈分別被切割。切割產生的自由3’端與對側的3’端進行交換和重連,形成Holliday交叉結構。4.**分子重組與解旋**:-Holliday交叉結構通過Cre酶的作用被解旋并重組,形成新的重組產物。這個過程導致兩個LoxP位點之間的DNA序列被刪除、反轉或易位,具體效果取決于LoxP序列的排列方式(方向和位置)。5.**條件性基因編輯**:-通過建立特異性Cre小鼠,該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動子驅動,可在特定細胞或組織或全身表達Cre重組酶。與帶有Lox位點的Flox小鼠雜交,子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠,實現條件性基因打靶(表達或敲除靶基因)。His-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。
dUTP,100mMSolution:分子生物學實驗中的高效工具dUTP(2'-脫氧尿苷5'-三磷酸)是一種重要的核苷酸,應用于分子生物學實驗中。其100mM溶液形式為研究人員提供了便捷、高效的實驗材料,尤其在PCR、qPCR、RT-PCR等技術中表現出色。產品特點高純度與穩定性dUTP溶液的純度≥99%(HPLC檢測),且不含DNase、RNase等雜質,確保實驗結果的可靠性。其以鈉鹽形式存在,用超純水配制,pH值調節至7.0左右,具有良好的化學穩定性。即用型設計該產品為即用型溶液,濃度為100mM,無需額外稀釋或處理,可直接用于多種分子生物學反應。防污染機制dUTP常用于替代dTTP,使擴增產物中包含尿嘧啶。結合尿嘧啶-N-糖基酶(UNG)使用時,可有效去除殘留的PCR產物污染,避免假陽性結果。性能與應用實驗應用dUTP適用于多種DNA合成反應,包括PCR、qPCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸、DNA測序和標記等。其在PCR中的應用尤為突出,通過引入尿嘧啶,可降低交叉污染的風險。優化實驗條件dUTP溶液的pH值和濃度經過優化,適合與多種酶(如TaqDNA聚合酶)配合使用,確保反應體系的高效性和特異性。Tn5 轉座酶可用于多種生物體,包括許多革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌以及酵母等。Recombinant Rat XPNPEP2 Protein,His Tag
由于Cas9 NLS系統不涉及DNA的整合,因此降低了外源DNA整合至細胞基因組的風險 。Recombinant Biotinylated Human CD161 Protein,His-Avi Tag
CUT&RUN和ChIC是兩種用于研究蛋白質-DNA相互作用的技術,它們有一些關鍵的區別:1.**技術原理**:-**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:ChIC技術利用抗體將感興趣的蛋白與ProteinA-MNase相結合來進行DNA切割。ChIC的優勢在于使用TF特異性抗體系住MNase,并只在結合位點裂解。-**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:CUT&RUN技術則是在核的輕微MNase處理后釋放單核小體和TF-DNA復合物,留下寡核小體。CUT&RUN通過在冰上進行簡短的消化反應,在TF結合的MNase擴散到周邊的基因組和裂解可接近的染色質之前在上清中恢復TF-DNA復合物。2.**操作步驟和簡便性**:-**ChIC**:ChIC可能需要甲醛固定操作,這可能重新引入了ChIP-seq的一些問題,如交聯導致的DNA和蛋白質的化學修飾。-**CUT&RUN**:CUT&RUN簡化了操作步驟,使用磁珠固定細胞核,適用于新鮮和冷凍組織樣本,縮短了生成DNA測序文庫的時間(1-2天)。3.**背景信號和信噪比**:-**ChIC**:ChIC產生的背景信號可能較高,因為它可能涉及到非特異性的DNA切割。
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin