Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過(guò)程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來(lái),科學(xué)家們通過(guò)對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開(kāi)發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開(kāi)發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。多泛素化的靶蛋白被26S蛋白酶體識(shí)別。26S蛋白酶體由一個(gè)20S顆粒和兩個(gè)19S調(diào)節(jié)顆粒組成。耐高鹽全能核酸酶
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來(lái)源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無(wú)堿基位點(diǎn)(AP位點(diǎn)),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對(duì)溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場(chǎng)景。此外,該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對(duì)RNA或不含尿嘧啶的DNA無(wú)作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會(huì)對(duì)檢測(cè)體系產(chǎn)生抑制。應(yīng)用場(chǎng)景去除PCR產(chǎn)物污染:通過(guò)降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過(guò)程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生抑制。Recombinant Cynomolgus PTK7/CCK4 Protein,His TagUBE2L3作為泛素化途徑中的關(guān)鍵酶,其在蛋白質(zhì)降解、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用。
Pfu DNA Polymerase:高保真PCR的選擇Pfu DNA Polymerase(Pfu酶)是一種源自嗜熱菌 Pyrococcus furiosus 的高保真DNA聚合酶,因其性能和廣泛的應(yīng)用而備受科研工作者青睞。產(chǎn)品特點(diǎn)Pfu DNA Polymerase具有高度的熱穩(wěn)定性和保真性。其分子量為90 kDa,具備5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,能夠在PCR擴(kuò)增過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,降低錯(cuò)誤率。與傳統(tǒng)的Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的保真性高出8倍以上,錯(cuò)誤率為1.3×10??。此外,Pfu酶在95°C孵育1小時(shí)后仍能保持90%以上的活性。性能優(yōu)勢(shì)Pfu DNA Polymerase在擴(kuò)增效率和速度上也表現(xiàn)出色。其擴(kuò)增速度可達(dá)4 kb/min,是普通Pfu酶的8倍。這種高效的擴(kuò)增能力使其能夠快速、準(zhǔn)確地?cái)U(kuò)增長(zhǎng)片段DNA,可擴(kuò)增長(zhǎng)度達(dá)10 kb。同時(shí),Pfu酶對(duì)低濃度模板的檢測(cè)靈敏度極高,即使在1 pg的模板量下也能有效擴(kuò)增。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)已成為基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、基因拷貝數(shù)變異研究等領(lǐng)域的工具。而One Step RT-qPCR Probe Kit憑借其產(chǎn)品特點(diǎn)和性能,為科研工作者提供了一種高效、可靠的解決方案,極大地推動(dòng)了相關(guān)研究的進(jìn)展。一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)一步法操作One Step RT-qPCR Probe Kit采用獨(dú)特的一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在一個(gè)反應(yīng)體系中。這種設(shè)計(jì)極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,減少了人為操作誤差和樣本污染的風(fēng)險(xiǎn)。相比傳統(tǒng)的兩步法,一步法節(jié)省了時(shí)間和人力成本,還提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性,尤其適合高通量樣本的檢測(cè)。(二)高靈敏度與特異性該試劑盒采用了先進(jìn)的探針技術(shù),結(jié)合優(yōu)化的酶體系和反應(yīng)緩沖液,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)低豐度靶標(biāo)基因的高靈敏度檢測(cè)。其特異性探針設(shè)計(jì)確保了與目標(biāo)序列結(jié)合,避免了非特異性擴(kuò)增的干擾,從而為定量分析提供了準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)支持。無(wú)論是對(duì)微量樣本中的基因表達(dá)進(jìn)行定量,還是對(duì)低濃度病原體進(jìn)行檢測(cè),One Step RT-qPCR Probe Kit都能表現(xiàn)出性能。Endo H,糖苷內(nèi)切酶 H 具有高度特異性的催化活性,它能夠特異性地水解 N - 連接寡糖鏈中兩個(gè)糖苷鍵。
高靈敏度與特異性該試劑采用熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合抗體封閉技術(shù),有效避免了低溫條件下的非特異性擴(kuò)增,提高了反應(yīng)的特異性和靈敏度。探針?lè)╭PCR通過(guò)熒光探針與目標(biāo)基因的特異性結(jié)合,避免了非特異性產(chǎn)物的干擾,檢測(cè)靈敏度和特異性高于傳統(tǒng)的SYBR Green方法。低濃度ROX校正染料試劑中含有低濃度ROX作為被動(dòng)參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號(hào)的差異,減少因移液誤差或樣品蒸發(fā)等因素引起的熒光波動(dòng),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。UDG防污染系統(tǒng)內(nèi)置UDG(Uracil-DNA Glycosylase)防污染系統(tǒng),通過(guò)降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止了實(shí)驗(yàn)室中殘留的PCR產(chǎn)物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)。快速擴(kuò)增與多重檢測(cè)優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速擴(kuò)增程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成高靈敏度檢測(cè),同時(shí)適用于多重PCR檢測(cè),可在單個(gè)反應(yīng)孔中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因。適用性該試劑適用于多種樣本類型,包括cDNA、基因組DNA等,尤其適合低豐度基因的定量檢測(cè),如低表達(dá)的mRNA、lncRNA、小RNA等。在gRNA的引導(dǎo)下,Cas9 NLS可以對(duì)特定DNA序列進(jìn)行剪切,適用于研究基因功能或進(jìn)行基因編輯 。耐高鹽全能核酸酶
Taq DNA Polymerase 能夠在相對(duì)較高的溫度下保持穩(wěn)定,其適催化溫度在75-80°C。耐高鹽全能核酸酶
Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye):擴(kuò)增的得力助手在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)是不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因克隆、基因表達(dá)分析、遺傳病診斷、病原體檢測(cè)等諸多領(lǐng)域。而一款PCR反應(yīng)體系則是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye)憑借其獨(dú)特的配方和性能,成為了眾多科研工作者的主要。一、熱啟動(dòng)機(jī)制:開(kāi)啟擴(kuò)增之門Hot-Start技術(shù)是該Master Mix的亮點(diǎn)之一。在常規(guī)PCR反應(yīng)中,由于Taq酶在室溫下就具有活性,容易導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合和延伸,從而產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。而Hot-Start Taq Master Mix通過(guò)特殊的化學(xué)修飾或抗體封閉技術(shù),在反應(yīng)初期將Taq酶的活性暫時(shí)抑制,只有當(dāng)反應(yīng)體系升溫至一定溫度時(shí),修飾或抗體才會(huì)被破壞,Taq酶活性得以釋放。這一機(jī)制有效避免了低溫下的非特異性擴(kuò)增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和準(zhǔn)確性,尤其適用于復(fù)雜模板、低豐度靶基因以及對(duì)特異性要求極高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。耐高鹽全能核酸酶
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin