高保真Cas9變體在實際應用中的優勢主要體現在以下幾個方面:1.**降低脫靶效應**:高保真Cas9變體通過減少與非目標DNA序列的結合,從而降低了基因編輯過程中的脫靶風險。這對于減少基因編輯可能帶來的非預期效果至關重要。2.**提高特異性**:通過工程化改造,如SpCas9-HF1、eSpCas9和HypaCas9等變體,通過在DNA相互作用位點引入突變,減少了對目標DNA的非特異性識別和切割。3.**擴展PAM序列兼容性**:一些高保真Cas9變體,如xCas93.7,能夠識別多種PAM序列,從而擴展了可編輯基因組區域的范圍。4.**提高效果**:在臨床中,高保真Cas9變體可以減少由于脫靶效應引起的潛在風險,提高基因的安全性和有效性。然而,高保真Cas9變體也存在一些局限性:1.**編輯效率可能降低**:在提高特異性的同時,可能會有一定的編輯效率。一些高保真變體可能在保持特異性的同時,編輯效率有所下降。2.**結構和功能復雜性**:高保真Cas9變體的結構改造可能增加其結構和功能的復雜性,這可能對實際應用中的穩定性和可預測性帶來挑戰。3.**成本和可用性**:開發和生產高保真Cas9變體可能需要更多的研究和資源投入,這可能影響其在某些應用中的成本效益。Pfu DNA Polymerase 適合擴增較長的DNA片段,有助于在基因編輯中處理大的基因區域或復雜的基因結構。Recombinant Human Nectin-2/CD112 Protein
為確保大腸桿菌表達的重組抑肽酶的純度和活性,需要考慮以下幾個關鍵步驟:1.**高質量的細胞培養**:在GMP法規下生產,確保無動物源成分,從而避免動物源性的病毒污染。2.**蛋白純化技術**:通過多次柱純化過程來獲得高純度的重組抑肽酶,通常純度達到≥95%(HPLC)。3.**活性測定**:使用標準化的生物活性測定方法來確保每毫克蛋白質的活性單位(EPU),通常≥3.0EPU/mgpro。4.**質量控制**:通過高效液相色譜(HPLC)等技術進行質量控制,確保蛋白含量和純度符合標準。5.**穩定性和儲存條件**:凍干粉在2~8℃條件下保存,有效期為2年,確保了長期穩定性。6.**使用建議**:提供明確的使用方法,包括推薦的結合pH值和溶解介質,例如使用0.9%NaCl溶解,并建議在pH<3.0條件下不結合,以保證活性。7.**法規符合性**:生產設備和環境符合相關法規要求,遵循NSFISO9001:2015質量體系,并符合GMP指導原則,確保產品質量和安全性。通過這些步驟,可以確保重組抑肽酶的純度和活性,從而在科研和生物技術應用中發揮其作用。Recombinant Human Nectin-2/CD112 ProteinTaq DNA Polymerase 能夠在相對較高的溫度下保持穩定,其適催化溫度在75-80°C。
EndoH糖苷內切酶H(EndoH)在實驗中通常用于分析以下類型的糖鏈:1.**高甘露糖型糖鏈**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**某些雜合型糖鏈**:EndoH也能對某些雜合型寡聚糖的殼二糖結構進行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。3.**N-連接糖鏈**:EndoH主要用于去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖,這有助于研究糖鏈結構和糖基化模式。4.**抗體糖型分析**:在IgG中,Fc區Asn297處的保守N-連接糖對其活性至關重要,EndoH可用于分析這些糖鏈。5.**糖蛋白的糖基化模式**:EndoH有助于分析糖蛋白的糖基化位點、糖基化程度以及糖鏈的具體結構。6.**糖鏈分析和結構表征**:在糖鏈分析的主要策略中,EndoH作為高效、準確、穩定的去糖基化方法,有助于從糖蛋白上游離糖鏈,然后進行詳細的分析表征。EndoH的使用可以為研究者提供關于糖蛋白糖基化模式的重要信息,尤其是在抗體藥物研究和開發中,對于理解糖鏈如何影響藥物的活性、穩定性和免疫原性具有重要意義。
檢測重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)的活性和穩定性通常涉及一系列生物化學和分子生物學實驗方法。以下是一些常用的檢測方法:1.**SDS-PAGE電泳**:-通過SDS-PAGE電泳分析EGFP的純度和分子量。-觀察是否有蛋白質降解或聚合的跡象。2.**WesternBlot**:-使用特異性的GFP抗體進行Westernblot,以檢測EGFP蛋白的存在和大小。-可以評估EGFP的表達水平和純度。3.**熒光光譜分析**:-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發和發射光譜。-評估熒光強度和比較大激發/發射波長,以確定其熒光特性。4.**流式細胞儀分析**:-如果EGFP融合蛋白表達在細胞中,可以使用流式細胞儀分析細胞群體的熒光強度。-這有助于評估EGFP的表達水平和細胞內分布。5.**熒光顯微鏡觀察**:-在熒光顯微鏡下觀察EGFP的亞細胞定位和表達模式。-通過時間序列成像,可以評估EGFP在活細胞中的動態變化和穩定性。6.**熱穩定性分析**:-通過逐漸升高溫度并測量熒光強度的變化,可以評估EGFP的熱穩定性。-熱穩定性差的EGFP可能會在高溫下迅速失去活性。7.**光穩定性測試(光漂白實驗)**:-通過持續光照并監測熒光強度的下降(光漂白),可以評估EGFP的光穩定性。許多Probe qPCR Mix (2×)產品采用熱啟動DNA聚合酶,能減少非特異性擴增,提高反應的靈敏度和特異性 。
NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白,它在N端和C端都添加了核定位信號(NLS),這使得它能夠更有效地進入細胞核并進行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統的引導RNA(gRNA)形成穩定的核糖核的蛋白(RNP)復合物,可以在進入細胞后立即定位到細胞核,從而誘導特定的DNA雙鏈斷裂,實現基因編輯。與傳統的mRNA或質粒系統相比,使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉錄和翻譯過程,因此可以避免將外源DNA插入基因組的風險,這對于基因編輯尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特點包括:1.無DNA:系統不添加外部DNA,降低了插入外源DNA的風險。2.高切割效率:雙NLS確保Cas9蛋白高效進入細胞核。3.低脫靶效應:Cas9核酸酶的瞬時表達提高了切割的特異性。4.節省時間:無需轉錄和翻譯過程。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA,以及通過電穿孔或注射與特定gRNA結合時的體內基因編輯。產品的保存條件通常是在-25~-15℃,有效期為一年。使用時,可以根據推薦的反應體系進行體外DNA裂解實驗,并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測消化效率。具體產品的詳細信息和應用指南,可以參考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料。在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase可以用于精確地引入特定位點的突變,或在基因組中插入特定的DNA序列。Recombinant Cynomolgus Galectin 3 Protein,His Tag
可以利用現有的計算工具,如CRISPR design tools,預測gRNA的活性和特異性,以輔助實驗設計 。Recombinant Human Nectin-2/CD112 Protein
重組人血清白蛋白(rHSA)是一種重要的蛋白質,廣泛應用于生物醫學領域。植物表達的細胞培養級重組人血清白蛋白(rHSA)具有多項特點和科研應用價值:1.**高純度和安全性**:植物源重組人血清白蛋白(rHSA)通過基因工程技術在植物如水稻中表達,避免了動物源成分和血源性的病毒污染的風險,提供了一種更安全、更純凈的蛋白質來源。2.**批次穩定性**:與來源于動物的血清白蛋白相比,植物表達的rHSA提供了更高的批次間一致性和穩定性,這對于科研和工業應用中的重復性和可靠性至關重要。3.**多功能性**:rHSA在細胞培養中可以作為重要的添加成分,有助于細胞生長和維持培養環境的穩定性。它還可以作為藥物載體,疫苗保護劑、細胞凍存保護劑和醫療器械包埋劑等。4.**生物相容性**:由于rHSA的化學性質與天然HSA非常接近,它在生物醫藥生產中具有很高的生物相容性,可以用于多種藥物的配方和醫療設備。5.**科研應用**:rHSA在科研中可用于細胞培養、藥物載體研究、疫苗開發、組織工程和再生醫學等領域。6.**生產規模**:植物表達系統具有大規模生產重組蛋白的潛力,這對于滿足全球對rHSA日益增長的需求至關重要。Recombinant Human Nectin-2/CD112 Protein
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin