SpCas9蛋白(來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白)在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶,能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用:1.**識別和結合**:SpCas9蛋白與一個單導向RNA(sgRNA)結合,形成RNP復合物。這個復合物能夠識別并結合到基因組中與sgRNA互補的特定DNA序列。2.**PAM序列識別**:SpCas9需要一個稱為原間隔子相鄰基序(PAM)的特定序列作為識別目標DNA的先決條件。對于SpCas9,這個PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**:一旦RNP復合物與目標DNA結合,SpCas9就會在PAM序列的3個堿基對的上游位置切割DNA雙鏈,產生一個雙鏈斷裂(DSB)。4.**引發DNA修復**:DNA雙鏈斷裂觸發細胞的DNA修復機制,包括同源定向修復(HDR)和非同源末端連接(NHEJ)。研究人員可以利用這些修復機制來插入、刪除或替換特定的DNA序列。5.**基因修改**:通過HDR,可以在斷裂的DNA兩端引入特定的DNA模板,從而實現精確的基因編輯。而NHEJ通常會導致小的插入或缺失(indel),這可以用來產生基因的敲除或敲入。6.**提高編輯效率**:為了提高SpCas9的編輯效率,研究人員可能會使用優化的sgRNA設計、蛋白質工程或嵌合融合蛋白等策略。
重組人血清白蛋白(rHSA),特別是通過植物表達系統生產的細胞培養級產品,以其高純度和質量一致性而受到科研和工業界的重視。以下是高純度rHSA的一些關鍵特點和意義:1.**純度標準**:高純度的rHSA通常意味著蛋白質含量達到99%以上,這通常通過高效液相色譜(HPLC)、SDS-PAGE電泳等方法進行驗證。2.**內素水平**:內素水平是衡量蛋白質純度的一個重要指標。高純度rHSA的內素水平通常非常低(例如,≤0.5EU/ml),這有助于減少細胞培養中潛在的內素污染。3.**宿主細胞蛋白(HCP)殘留**:高純度rHSA的宿主細胞蛋白殘留量非常低,這有助于減少細胞培養中外來蛋白的干擾。4.**無動物源成分**:由于rHSA是通過植物表達系統生產的,因此不含有動物源性成分,這降低了動物源性疾病傳播的風險。5.**批次一致性**:高純度rHSA的生產過程通常在嚴格控制的條件下進行,確保不同批次之間的質量一致性,這對于科學研究和商業生產至關重要。6.**應用廣**:高純度rHSA在細胞培養、生物制藥、藥物載體、疫苗開發等領域有著廣的應用。7.**安全性**:高純度rHSA的生產過程不涉及動物源材料,因此可以降低血源性疾病的風險,提高產品的安全性。Recombinant Human FGFR2 beta (IIIb) Protein,His Tag由于Pfu DNA Polymerase 對引物的質量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯誤導致的非目標突變。
重組人血清白蛋白(rHSA)是通過植物表達系統生產的細胞培養級產品,在科研領域有著廣泛的應用。以下是rHSA在科研中的一些主要應用:1.**細胞培養**:rHSA是細胞培養中的重要成分,它可以作為血清替代品,促進細胞生長和維持細胞培養環境的穩定性。由于其無動物源成分,可以減少血清中可能存在的病毒污染風險,適用于需要高生物安全性的細胞培養研究。2.**藥物載體**:rHSA因其良好的生物相容性和藥物結合能力,被用作藥物載體,有助于提高藥物的穩定性、延長藥物的半衰期,并可能改善藥物的靶向性。3.**疫苗保護劑**:在疫苗開發中,rHSA可以用作保護劑,有助于提高疫苗的穩定性和有效性。4.**細胞凍存保護劑**:rHSA在細胞凍存過程中起到保護作用,有助于提高細胞復蘇后的存活率。5.**醫療器械包埋劑**:在醫療器械領域,rHSA可以作為包埋劑,用于藥物洗脫支架或其他植入式醫療設備。6.**生物制藥**:rHSA在生物制藥生產中作為穩定劑和保護劑,有助于提高蛋白質藥物的穩定性和療效。7.**基因**:在基因領域,rHSA可能被用作基因載體,幫助基因傳遞至目標細胞。8.**化妝品添加劑**:在化妝品行業,rHSA可能因其保濕和修復特性而被用作添加劑。
在進行IdeSProtease的分子改造時,平衡酶的活性和穩定性是一個關鍵的挑戰。以下是一些策略,這些策略可以幫助研究者在提高酶穩定性的同時保持或甚至提高其催化活性:1.**定向進化**:使用定向進化技術進行多輪的突變和篩選,以獲得在所需條件下具有改進穩定性的酶變體,同時監測其催化活性,確保改造后的酶保持高效催化能力。2.**結構基礎的理性設計**:基于IdeSProtease的三維結構信息,識別可能影響穩定性和活性的關鍵氨基酸殘基,通過點突變或小肽插入來優化這些區域。3.**計算模擬**:利用分子動力學模擬和計算化學方法預測突變對酶穩定性和活性的影響,以指導理性設計。4.**糖基化修飾**:通過糖基化可以增加酶的溶解性和穩定性,但需注意不要干擾酶的活性位點或底物結合位點。5.**活性位點附近的柔性區域改造**:通過剛化柔性區域的策略提高酶的熱穩定性,同時保持活性位點的柔性以維持催化活性。6.**長距離相互作用分析**:研究蛋白質內部的長距離相互作用,識別影響穩定性和活性的遠程突變,通過這些突變優化酶的性能。7.**酶活性和穩定性的權衡分析**:通過實驗數據,分析酶活性和穩定性之間的關系,找到比較好平衡點。Phusion DNA Polymerase 應在后面加入反應體系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。
EndoH糖苷內切酶H(EndoH)在實驗中通常用于分析以下類型的糖鏈:1.**高甘露糖型糖鏈**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**某些雜合型糖鏈**:EndoH也能對某些雜合型寡聚糖的殼二糖結構進行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。3.**N-連接糖鏈**:EndoH主要用于去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖,這有助于研究糖鏈結構和糖基化模式。4.**抗體糖型分析**:在IgG中,Fc區Asn297處的保守N-連接糖對其活性至關重要,EndoH可用于分析這些糖鏈。5.**糖蛋白的糖基化模式**:EndoH有助于分析糖蛋白的糖基化位點、糖基化程度以及糖鏈的具體結構。6.**糖鏈分析和結構表征**:在糖鏈分析的主要策略中,EndoH作為高效、準確、穩定的去糖基化方法,有助于從糖蛋白上游離糖鏈,然后進行詳細的分析表征。EndoH的使用可以為研究者提供關于糖蛋白糖基化模式的重要信息,尤其是在抗體藥物研究和開發中,對于理解糖鏈如何影響藥物的活性、穩定性和免疫原性具有重要意義。
在基因編輯過程中,Pfu DNA Polymerase 可用于合成高質量的單鏈或雙鏈DNA修復模板。Recombinant Human HMGB1(His Tag)
大腸桿菌表達的重組抑肽酶(Aprotinin)是一種通過基因工程技術在大腸桿菌中生產的蛋白酶抑制劑,具有以下特性和應用:1.**來源**:重組抑肽酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統生產的,確保了無動物源性成分,減少了病毒污染的風險。2.**結構**:它是一種單體球狀蛋白,由58個氨基酸組成,具有三個交聯二硫鍵的單個多肽鏈。3.**功能**:作為一種競爭性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑,重組抑肽酶能夠抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶等的活性。4.**應用**:在生物技術過程中,重組抑肽酶可以替代動物源性抑肽酶,用于重組蛋白生產中抑制絲氨酸蛋白酶的活性,以及在細胞培養等過程中。5.**產品信息**:通常以粉末形式提供,具有明確的貨號和規格,如1mg或10mg的包裝。6.**產品性質**:包括外觀、溶解度、純度、蛋白含量、酶濃度和活性定義等詳細參數。7.**儲存條件**:凍干粉在2~8℃保存,有效期為2年。8.**使用方法**:推薦的結合pH>6.0,在pH<3.0的條件下不結合,可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃儲存。9.**注意事項**:產品作科研用途,操作時需穿著實驗服并佩戴一次性手套。Recombinant Human HMGB1(His Tag)
Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Recombinant Human Coagulation factor XI Protein
Recombinant Human CDCP1 Protein
Recombinant Human FGFR2 alpha(IIIb)(hFc Tag)
Recombinant Biotinylated Mouse TNFSF15 Protein
Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein
Recombinant Human IFN-gamma Protein
Recombinant Human PSGL-1 Protein
Recombinant Mouse MDL-1/CLEC5A Protein
Recombinant Human Epiregulin