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Recombinant Cynomolgus Neuropilin-1 Protein

來源: 發布時間:2024年10月24日

EndoH糖苷內切酶H(EndoH)在實驗中通常用于分析以下類型的糖鏈:1.**高甘露糖型糖鏈**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**某些雜合型糖鏈**:EndoH也能對某些雜合型寡聚糖的殼二糖結構進行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。3.**N-連接糖鏈**:EndoH主要用于去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖,這有助于研究糖鏈結構和糖基化模式。4.**抗體糖型分析**:在IgG中,Fc區Asn297處的保守N-連接糖對其活性至關重要,EndoH可用于分析這些糖鏈。5.**糖蛋白的糖基化模式**:EndoH有助于分析糖蛋白的糖基化位點、糖基化程度以及糖鏈的具體結構。6.**糖鏈分析和結構表征**:在糖鏈分析的主要策略中,EndoH作為高效、準確、穩定的去糖基化方法,有助于從糖蛋白上游離糖鏈,然后進行詳細的分析表征。EndoH的使用可以為研究者提供關于糖蛋白糖基化模式的重要信息,尤其是在抗體藥物研究和開發中,對于理解糖鏈如何影響藥物的活性、穩定性和免疫原性具有重要意義。

Cpf1是一種新發現的類2/型V CRISPR-Cas DNA內切酶,在不同系統中顯示出一系列的活性。Recombinant Cynomolgus Neuropilin-1 Protein,His Tag

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通過SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)和Westernblot(西方印跡)可以有效地檢測帶有His標簽的泛素蛋白的純度和完整性。以下是進行這些檢測的步驟:###SDS-PAGE步驟:1.**樣品準備**:-將重組泛素蛋白溶解在適當的緩沖液中,通常含有還原劑(如DTT或β-巰基乙醇)以斷裂二硫鍵。-將樣品在95-100°C下加熱5分鐘以變性蛋白質。2.**凝膠準備**:-根據需要的分辨率選擇合適的凝膠濃度(例如,12%或15%凝膠用于檢測20-100kDa的蛋白質)。3.**上樣**:-將變性后的樣品加入到凝膠的相應孔中,同時加入分子量標記物作為參照。4.**電泳**:-在恒定電壓或恒定電流下進行電泳,直到樣品在凝膠中充分分離。5.**染色**:-使用考馬斯亮藍或其他蛋白質染色劑對凝膠進行染色,以可視化蛋白質條帶。6.**分析**:-通過比較樣品條帶與分子量標記物,評估蛋白質的分子量和純度。###Westernblot步驟:1.**轉膜**:-將SDS-PAGE分離的蛋白質從凝膠轉移到PVDF或硝酸纖維素膜上。2.**封閉**:-使用封閉液(如5%脫脂奶粉或1%BSA溶液)封閉膜上未被蛋白占據的部分,以減少非特異性結合。3.**一抗孵育**:-使用特異性識別His標簽的抗體(一抗)與膜上的蛋白質孵育,通常在4°C過夜。Recombinant Human PDGF-AA Protein泛素蛋白的C末端通常通過酰胺鍵與靶蛋白的氨基團連接在一起,最常見的是與靶蛋白賴氨酸的ε氨基團相連。

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11A型肺炎多糖鼠單抗是針對肺炎鏈球菌11A型多糖的單克隆抗體,具有以下特點:1.**特異性**:鼠單抗具有高度的特異性,能夠識別并結合到11A型肺炎鏈球菌的多糖抗原。2.**制備方法**:通過將肺炎多糖與乙肝表面蛋白的偶聯物作為抗原免疫小鼠,然后從小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選出能夠表達特異性抗體的雜交瘤細胞株。3.**應用**:11A型肺炎多糖鼠單抗可用于定量檢測33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,其制備的腹水型單抗對不同批次的樣本回收率為95%~105%。4.**疫苗開發**:在肺炎鏈球菌疫苗的研發中,多糖蛋白結合疫苗是當前的趨勢,通過將多糖與蛋白偶聯,可以提供更高效價的抗體水平和免疫記憶。5.**免疫反應**:11A型肺炎多糖鼠單抗能夠誘導小鼠產生針對肺炎多糖的血清抗體,這有助于研究肺炎鏈球菌的免疫機制。6.**疾病預防**:肺炎鏈球菌是引起肺炎、腦膜炎和敗血癥等嚴重疾病的主要病原體,11A型肺炎多糖鼠單抗的研究有助于開發更有效的疫苗,預防相關疾病。7.**研究進展**:已有研究報道了使用半合成寡糖結合疫苗候選物,能夠激發對肺炎鏈球菌3型的保護性免疫反應。

N末端His標簽的泛素蛋白(RecombinantHumanUbiquitinProteinTagged-HisTag,UB)是一種經過遺傳工程改造,在其N末端融合了His標簽的泛素蛋白。以下是這種蛋白的一些特點:1.**His標簽**:N末端His標簽是一種常見的融合標簽,用于提高蛋白質的可溶性和便于通過親和層析進行純化。His標簽通常由6到10個組氨酸(His)組成。2.**重組表達**:這種泛素蛋白通常在大腸桿菌(E.coli)或其他宿主細胞中通過重組DNA技術表達。3.**高度保守**:泛素蛋白是一個76個氨基酸殘基的多肽,在真核生物中高度保守。4.**分子量**:由于N末端添加了His標簽,重組泛素蛋白的分子量會略大于天然泛素(約8.5kDa)。5.**純度**:重組泛素蛋白通常具有高純度(>95%bySDS-PAGE),適合用于各種生物化學和分子生物學實驗。6.**溶解性**:His標簽的添加可以提高蛋白質在水溶液中的溶解性,便于實驗操作。7.**穩定性**:凍干粉形式的重組泛素蛋白在-25~-15℃保存,具有較長的有效期,通常為一年。8.**應用廣**:N末端His標簽的泛素蛋白可用于多種實驗,包括蛋白質泛素化、E3泛素連接酶活性測定、蛋白質相互作用研究等。Probe qPCR Mix (2×) 支持多重qPCR,即在單個反應中同時檢測多個靶標基因 。

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在生產過程中,確保大腸桿菌表達的重組抑肽酶符合GMP(GoodManufacturingPractice,良好生產規范)標準,需要遵循一系列嚴格的質量控制和生產規范措施:1.**識別關鍵物料屬性(CMAs)**:確保穩定的物料來源,明確和理解物料對制劑產品研發的影響,包括微生物學安全性和人源特異性的病毒的考量。2.**確定關鍵工藝參數(CPPs)**:識別和控制影響產品質量的工藝參數,如溫度、CO2濃度、pH等,以及生物學范疇的工藝參數,確保產品達到預期的質量屬性目標。3.**確立CPP、CMA和CQA之間的關系**:使用DOE(DesignofExperiments,實驗設計)方法開展試驗設計,確定好的的CMA和CPP組合,以獲得滿足需求的CQA輸出。4.**遵循通用技術文件(CTD)的P.2章節要求**:在藥品研發及相關信息中,詳細描述物料屬性和工藝參數對產品CQA的風險分析和相互關系。5.**生產環境和設備**:生產設備和環境必須符合相關法規要求,遵循NSFISO9001:2015質量體系,并符合GMP指導原則。6.**質量控制**:進行嚴格的質量控制,包括對產品純度、活性、蛋白含量等的檢測,確保產品符合既定的質量標準。7.儲存和運輸:按照規定的條件儲存和運輸產品,確保其穩定性和有效性,一般凍干粉在2-8℃保存,有效期為2年。

CRISPR-Cas12a(以前稱為Cpf1)是一種類II型V型內切酶,偏好富含胸腺嘧啶的原間隔短回文重復序列鄰近基序。Recombinant Biotinylated Human IL-10 Protein,His-Avi Tag

Cas12a不僅具有順式切割活性,還具備獨特的反式切割活性,這使得它能夠無差別地裂解附近的單鏈DNA。Recombinant Cynomolgus Neuropilin-1 Protein,His Tag

EndoS,即糖苷內切酶S(Endo-S),是一種具有高度特異性的酶,它在生物化學研究中有著重要應用,尤其是在糖蛋白和抗體藥物偶聯物(ADCs)的研究中。以下是EndoS的一些關鍵特點:1.**特異性**:EndoS能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈的殼二糖結構,即在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之間的連接處進行切割。2.**應用**:在制備糖鏈定點ADC化合物中,EndoS被用于將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體糖基化位點,提供了一種重要的技術方法。3.**兼容性**:EndoS對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基團、熒光基團等衍生物作為底物,實現抗體糖基化修飾。4.**活性**:EndoS的活性對多肽沒有嚴格的要求,可以接受蛋白質、肽、天門冬酰胺或游離聚糖作為底物。但是,對于具有三、四個支鏈的唾液酸化及去唾液酸化的聚糖,EndoS沒有活性。5.**產品形式**:EndoS通常以帶有His標簽的形式存在,便于從反應中去除,這在實驗操作中提供了便利。6.**研究進展**:EndoS在去糖基化方法研究中是一個重要的工具,特別是在研究糖蛋白的多肽部分和多糖部分的結構和功能時。

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標簽: 技術服務
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