牛痘DNA拓撲異構酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）在實驗室中的使用主要涉及以下幾個步驟：1.**DNA載體連接**：-牛痘DNA拓撲異構酶I可以用于DNA載體連接，特別是在TOPO克隆載體制備中。它能夠識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT]，并與DNA形成共價連接形成穩定復合物，遇到DNA的5’-OH基團后，重新連接形成完整DNA鏈。2.**接頭連接**：-在NGS建庫中，牛痘DNA拓撲異構酶I可用于接頭連接。這包括將含有特定序列的接頭A和接頭B與酶一起孵育，以實現DNA片段的連接。3.**操作步驟**：-**質粒解旋**：將超螺旋質粒DNA與牛痘DNA拓撲異構酶I混合，在37°C下孵育5-15分鐘，以實現質粒的解旋。-**接頭連接**：將接頭A（含CCCTT序列）和接頭B（含5’OH）與牛痘DNA拓撲異構酶I混合，在37°C下孵育5-15分鐘，以實現接頭的連接。4.**注意事項**：-雙鏈接頭A通常5’端做NH2封閉修飾，以防止自連接；接頭A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴，再長的尾巴會導致連接效率大幅下降。-雙鏈接頭B的5’端必須包含-OH。-由于該酶應用廣，在不同的實驗中使用策略不同，需要靈活運用，并根據具體文獻進行調整。

在這個過程中，E1使用ATP的能量，在自身的活性位點的半胱氨酸殘基與泛素C末端的甘氨酸殘基形成硫酯鍵。Recombinant Mouse IL-13Ra2 Protein,His Tag

確保Cre重組酶只作用于特定細胞，主要通過以下幾種方式實現：1.**組織特異性啟動子**：-利用組織特異性啟動子控制Cre重組酶的表達，可以確保Cre酶只在特定組織或細胞中表達。這種方法通過將Cre基因置于特定細胞類型特有的啟動子控制之下，實現對Cre酶表達的精確控制。2.**誘導型Cre重組酶系統**：-通過使用Cre-ERT（雌素受體突變體與Cre重組酶的融合蛋白），可以實現對Cre活性的時間控制。在無他莫昔芬誘導時，Cre-ERT與熱激蛋白Hsp90結合，定位于細胞質中；當他莫昔芬給藥誘導時，Hsp90脫離Cre-ERT，使Cre-ERT進入細胞核發揮基因重組的作用。這種系統相當于為Cre-Lox系統加裝了一個由他莫昔芬控制的外源開關，使得體內基因編輯更具時空靈活性。3.**藥物誘導的Cre系統**：-例如Tet-on系統，通過四環素或其衍生物多西環素的添加來激起基因表達。在三重轉基因動物中，rtTA在特定啟動子的控制下表達，多西環素與rtTA結合，Cre的表達，導致固定的報告基因重組。4.**AAV遞送Cre**：-利用包含組織特異性啟動子的腺相關病毒（AAV）載體可以選擇性地將Cre重組酶遞送至特定細胞。

Recombinant Mouse IL-13Ra2 Protein,His Tag將Cas9/sgRNA復合物轉染到目標細胞中。可以使用脂質體介導轉染、電穿孔或其他轉染技術 。

Taq DNA Polymerase：科研中的關鍵工具Taq DNA Polymerase 是一種應用于分子生物學研究中的熱穩定DNA聚合酶，其獨特的性能和特點使其成為PCR技術的重要工具。產品特點Taq DNA Polymerase 的特點是其出色的耐熱性。該酶來源于嗜熱菌Thermus aquaticus，能夠在高溫條件下保持活性，適催化溫度為75-80℃，即使在95℃下保溫半小時，仍能保留50%以上的活性。此外，Taq酶具有5'→3'聚合酶活性，能夠在PCR反應中高效地合成DNA鏈。然而，它缺乏3'→5'校正活性，這意味著在擴增過程中可能會引入少量錯誤，但對于大多數常規PCR應用而言，這種特性并不影響其好的使用。Taq酶的另一個重要特性是其5'→3'外切酶活性，這一特性使其在探針法qPCR中具有獨特的優勢。此外，Taq酶在PCR產物的3'末端會添加一個A堿基，這使得PCR產物可以直接用于TA克隆。

Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl)：高效除PCR污染的關鍵酶在分子生物學研究中，PCR技術的應用極為廣，但PCR產物的交叉污染問題一直是影響實驗準確性和可靠性的關鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具，憑借其獨特的性能和廣的應用，已成為解決這一問題的理想選擇。一、產品特點高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶（dU）堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解，釋放游離尿嘧啶。這種酶對單鏈和雙鏈DNA均有效，但對RNA或長度不超過6個堿基的DNA寡核苷酸無活性。防止PCR產物污染UDG的主要應用之一是防止PCR產物的交叉污染。通過在PCR反應中使用dUTP替代dTTP，生成含有dU的PCR產物，UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA，從而防止其在后續反應中作為模板被擴增。反應條件兼容性UDG在pH8.0左右表現出活性，且不需要二價陽離子，可在較寬的pH范圍內工作。它對高離子強度（>200mM）敏感，因此在使用時需注意反應體系的離子濃度。在某些糖蛋白的純化方案中，利用 Endo H 對糖鏈的特異性水解作用，去除糖蛋白上的糖鏈。

在分子生物學研究中，RNA的完整性分析是評估RNA質量和功能的重要環節。10×RNALoadingBuffer作為一種高效、便捷的上樣緩沖液，在RNA電泳實驗中發揮著不可或缺的作用。本文將詳細介紹10×RNALoadingBuffer的產品特點和性能。一、產品特點高濃度設計10×RNALoadingBuffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液，使用時需稀釋至1×。這種高濃度設計減少了試劑的使用量，同時保證了樣品在電泳過程中的穩定性和均勻性。示蹤染料的雙重指示該緩沖液含有溴酚藍（BromophenolBlue）和二甲苯青（XyleneCyanolFF）兩種示蹤染料。溴酚藍在1.2%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳中與約500個堿基的RNA遷移速率相當，而二甲苯青則與約5000個堿基的RNA遷移速率相當。這種雙重示蹤設計能夠直觀地反映電泳的進程，幫助實驗人員準確判斷RNA的遷移情況。無RNase污染RNA分子對RNase極為敏感，因此在RNA實驗中，避免RNase污染是關鍵。10×RNALoadingBuffer經過嚴格的質量控制，確保無RNase雜質污染，從而保證RNA樣品的完整性。適用性該緩沖液適用于多種類型的RNA樣品，包括總RNA、小RNA以及特定RNA的片段的電泳分析。它不僅可用于甲醛變性的瓊脂糖凝膠電泳，也適用于非變性電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)經過嚴格的穩定性測試，即使在反復凍融后仍能保持穩定的活性。Purified Protein A

One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種用于實時熒光定量PCR的試劑盒，它結合了反轉錄和PCR擴增步驟。Recombinant Mouse IL-13Ra2 Protein,His Tag

核酸內切酶VIII（EndonucleaseVIII）是一種來自大腸桿菌的DNA損傷修復酶，具有以下特點：1.**雙功能活性**：核酸內切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**釋放受損嘧啶堿基**：N-糖基化酶活性可以釋放雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，生成一個脫嘌呤(apurinic,AP)位點。3.**切割AP位點**：AP裂解酶活性可以切割AP位點的3'和5'端，產生一個具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。4.**識別并切除受損堿基**：核酸內切酶VIII可以識別并切除多種受損堿基，包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲。5.**與EndonucleaseIII的區別**：雖然核酸內切酶VIII與核酸內切酶III相似，但核酸內切酶VIII具有β和δ裂解酶活性，而核酸內切酶III具有β裂解酶活性。6.**應用領域**：核酸內切酶VIII可以應用于單細胞凝膠電泳、NGS建庫中DNA損傷修復、酶法合成DNA中釋放DNA鏈、堿洗脫，搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)進行含U片段的克隆等。