膜片鉗的數據如何處理:1)細胞吸附式膜片(cell attached patch)是膜片鉗的基本方式,其它方式由此衍生。這種膜片形式比較穩定因細胞骨架及有關代謝過程是完整的,故對細胞結構和環境干擾比較...
膜片鉗使用的基本方法是,把經過加熱拋光的玻璃微電極在液壓推進器的操縱下,與清潔處理過的細胞膜形成高阻抗封接,導致電極內膜片與電極外的膜在電學上和化學上隔離起來,由于電性能隔離與微電極的相對低電阻(1~...
胎牛血清的主要成分有哪些?脂聯素,有人發現,將牛脂聯素注射入C57小鼠,可降低循環血糖水平和在高脂飲食后提高脂肪清理率。持續注射牛脂聯素兩周后,胰島素敏感性和葡萄糖耐受性明顯增強,高脂喂養小鼠肝臟脂質...
膜片鉗系統有如下應用局限性(1)光能應用于懸浮細胞的紀錄,因此大部分的紀錄對象為化細胞,而對于需要貼壁生長的大多數正常細胞,現有的自動膜片鉗系統就無法紀錄;(2)在紀錄對象上,目前的膜片鉗系統只能紀錄...
膜片鉗實驗難度大、技術要求高,要掌握有關技術和方法雖不是很困難的事,但要從一大批的實驗數據中,經過處理和分析,得出有意義、有價值的結果和結論,就顯得不那么容易,有許多需要注意和考慮的問題,包括減少噪音...
如何挑選適合細胞生長的胎牛血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清,或胚胎干細胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前...
胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實驗證明,經過正確處理的熱滅活胎牛血清,對于大多數的細胞而言都是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至可能因為高溫處理影響了血清的質量...
用于體外細胞培養的胎牛血清及其制備方法:將已存放血漿的試管置入-20~0℃環境下保存備用;將血漿分離提取胎牛血清,具體步驟如下:取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫...
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內的瓶中。采的血瓶采的血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫...
胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,活性炭可以與親脂性分子結合,因此已用于從FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮質醇、睪酮、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些...
如何區別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。2、pH,國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也...
冷凍電鏡技術是在20世紀70年代提出的,早在20世紀70年代科學家們就利用冷凍電鏡研究病毒分子的結構,頭次提出了冷凍電鏡技術的原理、方法以及流程的概念。冷凍電鏡的發展:冷凍電鏡到底是什么?從上世紀70...
低溫透射電鏡技術的應用:膠束體系對于濃度、pH、添加劑種類等液相環境條件的變化非常敏感,如果是干燥狀態其結構與有液相完全不同,因此必須用低溫透射電鏡表征其結構。通常情況下,膠束有球狀、囊泡狀、棒狀、層...
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性...
膜片鉗電生理技術:神經元細胞膜上有離子通道,它們控制電荷流入和流出細胞,從而調節神經元激發。一種用于研究這些通道的生物物理學特性的極為有用的技術被稱為膜片鉗記錄。在這種方法中,神經科學家把拋光的玻璃微...
細胞培養用到的胎牛血清需要滅活嗎:細胞培養胎牛血清是不可或缺重要培養基,胎牛血清中含有諸多細胞生長因子,維生素,氨基酸等物質。我們常會看到胎牛血清的標注上有對產品滅活也有沒有滅活的,胎牛血清為什么不需...
膜片鉗的技術原理:膜片鉗技術是用玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來,由于電極尖銳端與細胞膜的高阻封接,在電極尖銳端籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從...
冷凍電鏡技術測定結構的幾種方法:X射線晶體學、NMR、和冷凍電鏡技術各有優缺點,將這幾種方法結合共同研究結構與功能將使結構生物學家對所研究的分子有更為全部的理解,而這些信息是單用任何一個方法所無法獲得...
冷凍電鏡技術原理之電子晶體學:利用電子顯微鏡對生物大分子在一維、二維以致三維空間形成的高度有序重復排列的結構(晶體)成像或者收集衍射圖樣,進而解析這些生物大分子的結構,這種方法稱為電子晶體學。其適合的...
Real-time PCR鏈式反應的特點:靈敏度高:PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12)量級的起始待測模板擴增到微克(μg=-6)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞...
Real-time PCR從用途上分可以分為定性分析和定量分析:定量分析可以分為定量和相對定量兩種。定量指的是我們想知道某個基因在初始樣品中具體的拷貝數或濃度是多少?定量實驗必須使用已知拷貝數的標準品...
膜片鉗實驗系統:根據不同的電生理實驗要求,可以組建不同的實驗系統,但有若干共同的基本部件,包括機械部分(防震工作臺、屏蔽罩、儀器設備架)、光學部分(顯微鏡、視頻監視器、單色光系統)、電子部件(膜片鉗放...
冷凍電鏡技術是什么呢?冷凍電鏡用于生物樣品三維結構解析,包含單顆粒分析、微晶電子衍射和冷凍電子斷層掃描3種技術。冷凍電鏡單顆粒分析技術(cryo-EMSPA)是一種以單顆粒形式分析生物分子組裝的新方法...
膜片鉗技術是通過微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)接觸細胞膜,用千兆歐姆以上的阻抗使之封接,在電學上分隔和電極尖開口處相接的細胞膜的小區域(膜片)以及其周圍,在此基礎上固定點位,對這膜片上的離子通道的離...
Real-time PCR鏈反應:嵌套聚合酶鏈反應:通過減少DNA非特異性擴增的背景,提高DNA擴增的特異性。兩組引物用于兩個連續的PCR。在個反應中,一對引物用于產生DNA產物,除了預期的靶之外,該...
膜片鉗技術本質上也屬于電壓鉗范疇,兩者的區別關鍵在于:①膜電位固定的方法不同;②電位固定的細胞膜面積不同,進而所研究的離子通道數目不同。電壓鉗技術主要是通過保持細胞跨膜電位不變,并迅速控制其數值,以觀...
為了便于對所檢測樣本進行比較,在real-timeQ-PCR反應的指數期,首先需設定一定熒光信號的域值,一般這個域值(threshold)是以PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號(bas...
膜片鉗實驗中電極制備之分兩次拉制,首先次拉長7~10mm,直徑小于200μm,在此基礎上進行第二次拉制,較終使尖銳端的直徑為1~2μm,兩步拉制的目的主要是使電極前端的錐度變大,狹窄部長度縮短,因此可...
胎牛血清:胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質對促進細胞生長或...
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性...