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甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

來源: 發布時間:2024年10月11日

Genovis的PNGase F 是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復合物、雜交體或高甘露糖寡糖的內層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。 在反應過程中,從中去除聚糖的天冬酰胺殘基被脫酰胺為天冬氨酸。釋放的低聚糖完好無損,可用于進一步分析。N-糖的去除被用于MS分析的樣品制備,以降低蛋白質的異質性,使游離的糖分析成為可能,并研究N-糖的功能作用。 該酶在大腸桿菌中表達,該重組基因來源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。 評價抗體片段對完整蛋白聚集的影響。 IgG1 mAb1和mAb2在Biogen生產。 mAb1被糖基化,主要的糖型是具有0和1半乳糖的he心聚焦雙觸角聚糖(FA2和FA2G1); mAb2被糖基化。采用合適的酶策略來去除這些GalNAc并簡化生物制藥的表征。甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

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Genovis的ImpaRATOR? 和 OpeRATOR? - 兩種協同的作用:O-糖蛋白酶。使用ImpaRATOR或OpeRATOR消化后分析依那西普重糖基化區域O-聚糖位點的覆蓋率(圖3)。使用OpeRATOR鑒定對應于所有13個O-聚糖位點的肽,而使用ImpaRATOR只能明確鑒定10個位點。ImpaRATOR 可能比 OpeRATOR (1) 具有更具選擇性的氨基酸序列偏好,此處由 S186 和 T245 位點缺乏消化來表明。此外,ImpaRATOR 在兩個相鄰的 O-糖基化氨基酸之間顯示出有限的裂解,如 S213 位點酶解肽的缺乏以及 T200 和 T217 位點酶解肽的低強度所證明的那樣。在OpeRATOR酶解樣品(T184-S199和T200-H204;圖2b和d),而在ImpaRATOR消化的樣品中,具有漏裂的相應肽(S184-H204)的強度更高。 雖然OpeRATOR顯示出更高的O-聚糖位點覆蓋率,但使用ImpaRATOR進行消化可以表征O-聚糖結構,包括唾液酸化物種。例如,條形圖插入顯示了兩種糖肽 T184-V198 和 T205-P207 的 O-聚糖種類。這應該與使用OpeRATOR的消化進行比較,在OpeRATOR中,必須去除唾液酸才能產生酶活性,這意味著有關唾液酸化的信息丟失。總而言之,ImpaRATOR 和 OpeRATOR 酶共同提供了有關聚糖組成和 O-聚糖位點的完整信息。陜西N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究用SialEXO處理血清,上樣于GlycOCATCH,洗滌,洗脫O-糖基化蛋白。Swiss Prot 數據庫鑒定蛋白質列表。

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α連接的Genovis的GalNAcs的水解:GalNAcEXO 是一種 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶,可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 殘基。與絲氨酸或蘇氨酸連接的 GalNAc(稱為 Tn 抗原)被 GalNAcEXO 快速有效地水解,并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。Genovis的GalNAcEXO 是一種外α-N-乙酰半乳糖胺酶,用于有效水解與糖蛋白(Tn 抗原)中的絲氨酸或蘇氨酸殘基相連的 α-N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc)。該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAc 上顯示活性。GalNAcEXO 在天然條件下水解糖蛋白上的 GalNAc,在 pH 值 6.0 至 7.6 范圍內具有高度活性。

Genovis的PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復合物、雜交或高甘露糖寡糖的內層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。該酶用于MS分析前的樣品制備,以降低蛋白質異質性并實現游離的聚糖分析,并研究N-聚糖的功能作用。1. 對所有哺乳動物N-聚糖的高效水解;2.對多種糖蛋白具有活性;3.可固定在即用型離心柱產品形式;4. 自動化友好型,96孔板,用于高通量 N-糖去除。Genovis的ImpaRATOR 是一種 O-糖依賴性蛋白酶,可消化攜帶粘蛋白型。O-聚糖的蛋白質,包括唾液酸化物質、糖基化絲氨酸和 Thr 殘基的 N-末端。該酶產生攜帶 O-糖的糖肽,從而實現 O-糖譜分析、位點占用測定和 O-糖肽圖譜以及使用 LC-MS 分析的中級方法。1. 特異性廣 - 接受多種 O-聚糖變體,包括唾液酸化物種;2. 可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點的 N 末端;3. 穩健的消化,增強復雜生物制藥的表征。OmniGLYZOR特點:與LC-MS兼容;完全去除聚糖,改進蛋白的分析;

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Genovis 集團由瑞典 Genovis AB 和美國全資子公司 Genovis Inc. 組成。該公司的在納斯達克北方增長市場上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關系。 Genovis的經營理念是為生物制藥和研究行業的客戶提供工具,以促進和節省開發新治療方法和診斷的時間。Genovis 酶產品,稱為 SmartEnzymes,被世界各地的科學家使用,創新的產品形式促進了生物藥物的開發和質量控制。 通過在2020年收購QED Bioscience,產品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發和診斷檢測的抗體和試劑。在 網站 上閱讀有關QED的更多信息 Genovis 研發活動的基石是客戶關系,使產品開發能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發新工作流程和新靶點抗體的學術團體的合作同樣有價值。GlycOCATCH的應用包括O糖蛋白和肽的特異性富集或去除、糖組學、復雜樣品的研究和生物制藥的表征。凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質組學研究

對天然糖蛋白或游離的聚糖結構上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

G0F 抗體在 30 分鐘內:半乳糖的存在會影響zhiliao性抗體引發的效應功能,為了研究抗體的作用方式,可能需要徹底去除半乳糖殘留物。Genovis的GalactEXO Immobilized 的 β1-4 半乳糖苷酶活性在曲妥珠單抗上使用 30 分鐘孵育證明。genovis的GalactEXO Immobilized 由強大的 GalactEXO 酶組成,該酶固定在瓊脂糖珠上,并以易于使用的微離心柱形式格式化。GalactEXO是β-半乳糖苷酶的混合物,可有效去除N-和O-糖基化蛋白上的半乳糖殘基。使用FabRICATOR?將抗體消化成亞基,并使用LC-MS進行分析。使用 GalactEXO 凍干和 GalactEXO 固定化都可以看到向 G0F 糖型的轉變,但后者在z終制劑中沒有留下酶。沒有任何半乳糖基化結構表明半乳糖殘基完全水解,因此LC-MS數據中任何剩余的次要峰都可以注釋為亞基的糖化。沒有任何半乳糖基化結構表明半乳糖殘基完全水解,因此LC-MS數據中任何剩余的次要峰都可以注釋為亞基的糖化。甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

標簽: 中鹽核酸酶
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