Genovis的ImpaRATOR? 和 OpeRATOR? - 兩種協同的作用：O-糖蛋白酶。使用ImpaRATOR或OpeRATOR消化后分析依那西普重糖基化區域O-聚糖位點的覆蓋率（圖3）。使用OpeRATOR鑒定對應于所有13個O-聚糖位點的肽，而使用ImpaRATOR只能明確鑒定10個位點。ImpaRATOR 可能比 OpeRATOR （1） 具有更具選擇性的氨基酸序列偏好，此處由 S186 和 T245 位點缺乏消化來表明。此外，ImpaRATOR 在兩個相鄰的 O-糖基化氨基酸之間顯示出有限的裂解，如 S213 位點酶解肽的缺乏以及 T200 和 T217 位點酶解肽的低強度所證明的那樣。在OpeRATOR酶解樣品（T184-S199和T200-H204;圖2b和d），而在ImpaRATOR消化的樣品中，具有漏裂的相應肽（S184-H204）的強度更高。 雖然OpeRATOR顯示出更高的O-聚糖位點覆蓋率，但使用ImpaRATOR進行消化可以表征O-聚糖結構，包括唾液酸化物種。例如，條形圖插入顯示了兩種糖肽 T184-V198 和 T205-P207 的 O-聚糖種類。這應該與使用OpeRATOR的消化進行比較，在OpeRATOR中，必須去除唾液酸才能產生酶活性，這意味著有關唾液酸化的信息丟失。總而言之，ImpaRATOR 和 OpeRATOR 酶共同提供了有關聚糖組成和 O-聚糖位點的完整信息。在天然條件下使用OmniGLYZOR Microspin色譜柱，可在3小時內有效去除C1 抑制劑O-聚糖。N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

為了研究 OglyZOR 對天然糖蛋白的活性，將該酶與依那西普、TNFR 和阿巴西普在 37°C 下有或沒有 SialEXO 孵育 1 小時。當唾液酸被去除時，OglyZOR酶有效地水解了所有三種底物中的O-聚糖。Genovis的OglyZOR 酶可有效水解天然糖蛋白中的he心 1 二糖 （Gal-β1,3-GalNAc）。這使得這些酶適合在LC-MS分析之前制備樣品，以鑒定其他PTM或確認氨基酸序列O-糖基化生物制藥的全去糖基化：O-糖基化生物制藥（如依那西普）很難表征。為了能夠通過質譜法測定完整質量數，我們進行了酶促總去糖基化。N-聚糖被Genovis的PNGase F裂解，而O-聚糖可以與OglyZOR和SialEXO一起去除。。N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究ImpaRATOR 來源于銅綠假單胞菌，在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽，分子量為 97 kDa。

用于糖蛋白去唾液酸化的凍干酶混合物。Genovis的SialEXO 凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在 2000 個單位的小瓶中，用于 2 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 用于方法開發的靈活格式；2. 可以結合酶以提高效率；3. 適用于自動化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。用于水解ɑ2-3-連接唾液酸的凍干酶。 Genovis的SialEXO 2-3凍干劑以凍干粉末的形式提供，裝在500個單位的小瓶中，用于0.5mg糖蛋白的去唾液酸化。 與唾液酸酶混合物 SialEXO 相比，SialEXO 2-3 是一種 α2-3 特異性唾液酸酶，允許對 α2-3 連接的唾液酸進行靶向分析。O-和N-糖基化蛋白的高效α2-3去唾液酸化可以在1小時內實現。

與PNGase F類似，Genvois的OmniGLYZOR 水解 N-和粘蛋白型 O-聚糖：糖基化往往是異質的，這使得對高度糖基化的生物zhiliao藥物的分析具有挑戰性。完整質量數的確認以及其他產品質量屬性的表征受到不同糖型復雜性的阻礙，這就是為什么有效的聚糖去除工具簡化了此類分析的原因。 雖然 N-聚糖包含一個共同的結構，并且可以通過 PNGase F 整體去除，但粘蛋白型 O-聚糖在結構上更加多樣化，具有多個不同的he心。OmniGLYZOR含有固定化酶的混合物，能夠依次分解O-聚糖，以完全去除最常見的O-聚糖結構（二唾液酸和單唾液酸基he心1和Tn抗原）。GalNAcEXO 酶來源于Akkermansia muciniphila，在大腸桿菌中表達，帶有His標簽，分子量為52 kDa。

Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物，用于有效水解天然 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上的 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接巖藻糖殘基。它是 N-和 O-糖蛋白的聚糖結構分析以及寡糖的外切糖苷酶陣列的寶貴工具。1. 高效α-巖藻糖苷酶混合物 – 快速去除 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖；2. 可靠的酶解增加了對外切糖苷酶陣列的信心；3. 可固定在即用型離心柱中。用于糖蛋白去氟糖基化的凍干酶。Genovis的FucosEXO凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在2000單位的小瓶中，用于2mg糖蛋白的去碳基化。SialEXO在天然條件下水解糖蛋白，在pH值范圍為6.5至9時顯示出活性。河北PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發

OmniGLYZOR特點：與LC-MS兼容；完全去除聚糖，改進蛋白的分析；N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

與PNGase F類似，Genvois的OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物，可快速有效地去除抗體、融合蛋白和其他糖基化蛋白上的 N 和簡單的粘蛋白型 O-聚糖。聚糖的去除被用于減少異質性，以促進蛋白質的分析，例如質譜法。去糖基化也可用于研究聚糖的功能作用。N-和粘蛋白型O-連接聚糖的快速高效去糖基化；即用型離心柱形式 - 無酶干擾分析；與LC-MS兼容。與PNGase F類似，Genvois的與PNGase F類似，Genvois的OmniGLYZOR 含有去除 N-糖和最常見的粘蛋白型 O-糖所需的酶，即單唾液酸和二唾液酸he心 1 和 Tn 抗原 （α-GalNAc）。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下組分：PNGase?F；O-糖苷酶。N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究