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海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024年07月18日

FucosEXO中的酶在大腸桿菌中表達(dá),帶有His標(biāo)簽,分子量為87 kDa和64 kDa。FucosEXO在天然條件下水解糖蛋白上的巖藻糖,在6至8的pH值范圍內(nèi)顯示出高活性,無需輔助因子或添加劑。1. 用于方法開發(fā)的靈活格式;2. 可以結(jié)合酶以提高效率;3. 適用于自動化工作流程;4.即用型 - 只需加水即可。Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物,用于在 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上有效水解 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖。人血清中 O-糖蛋白的富集:GlycOCATCH還可用于從復(fù)雜的樣品混合物(如人血清)中選擇性富集O-糖基化蛋白。簡而言之,用Genovis的SialEXO處理血清并應(yīng)用于GlycOCATCH樹脂。洗滌樹脂,用8M尿素洗脫O-糖基化蛋白。用胰蛋白酶消化樣品并使用 RP-LC-MS/MS 進(jìn)行分析,并使用 Swiss Prot 數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質(zhì)列表。O-糖基化蛋白以黃色表示。唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。SialEXO酶可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

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SialEXO 2-3 在天然條件下水解糖蛋白,在 pH 值范圍為 7.0 至 9.0 時(shí)顯示出活性。該酶來源于Akkermansia muciniphila,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶具有 His 標(biāo)簽,分子量為 66 kDa。1. 用于方法開發(fā)的靈活格式;2. 可以結(jié)合酶以提高用于離心柱中糖蛋白去唾液酸化的固定化酶。Genovis的SialEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的SialEXO酶,用于糖蛋白的去唾液酸化,而不會被酶污染z終制劑。它水解天然糖蛋白上的唾液酸(α2-3、α2-6 和 α2-8)并釋放出聚糖。效率;3. 適用于自動化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可。海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究評價(jià)抗體片段對完整蛋白聚集的影響:可使用Genovis的IgdE酶(FabALACTICA?)和PNGaseF酶。

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該酶適用于在釋放的聚糖結(jié)構(gòu)上修剪半乳糖,用于外切糖苷酶陣列,或用于生成具有均相 G0/G0F 聚糖譜的抗體。1. 高效β-半乳糖苷酶混合物 – 快速去除末端 β1-3 和 β1-4-連接的半乳糖;2. 有助于在亞基水平上識別糖基化修飾;3. 可固定在即用型離心柱中。Genovis的GalactEXO是一種外切糖苷酶,含有β-半乳糖苷酶的混合物,可有效去除N-和O-糖基化蛋白或寡糖上的半乳糖殘基。該混合物由兩種半乳糖苷酶組成,可高效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖酶。GalactEXO在天然條件下水解糖蛋白,并在5.5至7.5的寬pH值范圍內(nèi)顯示活性。

由于蛋白質(zhì)的O-糖模式的異質(zhì)性和O-糖結(jié)構(gòu)的OpeRATOR特異性,形成了重疊的肽,從而可以獲得O-糖位點(diǎn)的完整圖譜為了進(jìn)行比較,相同材料的標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶消化物, 顯示難以分析的少量且非常大的糖肽。使用Genovis的OpeRATOR進(jìn)行O-糖位點(diǎn)定位:OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶,可消化絲氨酸和蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的粘蛋白型 O-糖蛋白 N 端。這會產(chǎn)生攜帶O-糖的糖肽,并能夠使用質(zhì)譜法進(jìn)行O-糖分析、O-糖肽圖譜以及中級分析。下面是OpeRATOR消解位點(diǎn)的示意圖。倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等。

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genvois的OpeRATOR 是一種內(nèi)切蛋白酶,可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基化蛋白的肽鍵的水解。內(nèi)切蛋白酶具有高特異性,可消化絲氨酸或蘇氨酸殘基的O-聚糖N端的蛋白質(zhì)。 OpeRATOR 活性需要粘蛋白型的 O-聚糖,并且該酶不會用 N-連接聚糖消化糖蛋白。該酶對具有亞洲化he心1 O-聚糖的位點(diǎn)z活躍。它還消化唾液酸化的he心 1 和he心 3,但程度要低得多。為了獲得z佳性能,需要去除唾液酸,因此,SialEXO凍干(唾液酸酶混合物)包含在購買中。 GlycOCATCH親和純化以方便的離心柱形式提供,包含4 個 GlycOCATCH。海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

ImpaRATOR? 和 OpeRATOR? - 兩種協(xié)同的作用:共同提供了有關(guān)聚糖組成和 O-聚糖位點(diǎn)的完整信息。海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR 水解 N-和粘蛋白型 O-聚糖:糖基化往往是異質(zhì)的,這使得對高度糖基化的生物zhiliao藥物的分析具有挑戰(zhàn)性。完整質(zhì)量數(shù)的確認(rèn)以及其他產(chǎn)品質(zhì)量屬性的表征受到不同糖型復(fù)雜性的阻礙,這就是為什么有效的聚糖去除工具簡化了此類分析的原因。 雖然 N-聚糖包含一個共同的結(jié)構(gòu),并且可以通過 PNGase F 整體去除,但粘蛋白型 O-聚糖在結(jié)構(gòu)上更加多樣化,具有多個不同的he心。OmniGLYZOR含有固定化酶的混合物,能夠依次分解O-聚糖,以完全去除最常見的O-聚糖結(jié)構(gòu)(二唾液酸和單唾液酸基he心1和Tn抗原)。海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

標(biāo)簽: 中鹽核酸酶
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