C1抑制劑的去糖基化：在O-糖基化生物制藥的生產(chǎn)過(guò)程中，由于he心GalNAc殘基的加工不完全，可能會(huì)出現(xiàn)Tn抗原。這表現(xiàn)為具有 203 Da HexNAc 單位差異的重復(fù)質(zhì)量位移。為了確認(rèn) Tn 抗原的存在，可以應(yīng)用以下工作流程，此處在重度（26 個(gè)位點(diǎn)）O-糖基化 C1 抑制劑上演示。首先，使用PNGaseF修剪糖蛋白的N-糖，使用Genovis的OglyZOR和SialEXO修剪he心1 O-糖。依那西普的磷性能測(cè)試?：依那西普是另一種具有挑戰(zhàn)性的生物制藥模型分子，攜帶 13 個(gè) O-聚糖位點(diǎn)，其中平均 9 至 10 個(gè)位點(diǎn)被占用。ImpaRATOR 凍干劑以?xún)龈煞勰┑男问教峁b在 2000 單位小瓶中，用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。甘肅用于自動(dòng)化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線，分別滿(mǎn)足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中，細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級(jí)MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級(jí)膠原酶、AAV滴度檢測(cè)產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù)、QED抗體對(duì)、AAV中和抗體、蛋白酶等；相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國(guó)BASF、德國(guó)Sartorius、德國(guó)Nordmark、瑞典Genovis、美國(guó)QED、中國(guó)君研生物等。浙江N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開(kāi)發(fā)用于LC-MS分析之前制備樣品，以鑒定其他PTM或確認(rèn)氨基酸序列。

為了研究 OglyZOR 對(duì)天然糖蛋白的活性，將該酶與依那西普、TNFR 和阿巴西普在 37°C 下有或沒(méi)有 SialEXO 孵育 1 小時(shí)。當(dāng)唾液酸被去除時(shí)，OglyZOR酶有效地水解了所有三種底物中的O-聚糖。Genovis的OglyZOR 酶可有效水解天然糖蛋白中的he心 1 二糖 （Gal-β1,3-GalNAc）。這使得這些酶適合在LC-MS分析之前制備樣品，以鑒定其他PTM或確認(rèn)氨基酸序列O-糖基化生物制藥的全去糖基化：O-糖基化生物制藥（如依那西普）很難表征。為了能夠通過(guò)質(zhì)譜法測(cè)定完整質(zhì)量數(shù)，我們進(jìn)行了酶促總?cè)ヌ腔-聚糖被Genovis的PNGase F裂解，而O-聚糖可以與OglyZOR和SialEXO一起去除。。

在Genovis的PNGaseF去除N-聚糖并用SialEXO和GalactEXO截?cái)郞-聚糖后，在質(zhì)譜圖中觀察到幾個(gè)與GalNAcs相關(guān)的峰。為了去除剩余的GalNAc殘基，應(yīng)用GalNAcEXO酶。用GalNAcEXO處理后觀察到的單個(gè)蛋白峰顯示完全去除剩余的GalNAcs。?GalNAcEXO在生理緩沖液和中性pH值中具有活性，使其與大多數(shù)樣品相容。此外，GalNAcEXO的活性不依賴(lài)于任何可能影響LC-MS分析的輔因子，如BSA。根據(jù)底物的性質(zhì)，糖蛋白的GalNAcEXO反應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成，而更復(fù)雜的樣品可能需要孵育過(guò)夜。Genovis的GalNAcEXO也可固定在離心柱中，以便快速方便地處理樣品，在制備過(guò)程中不會(huì)殘留酶。連接的巖藻糖殘基，而對(duì)于非常復(fù)雜的樣品可能需要更長(zhǎng)的孵育時(shí)間。

FucosEXO中的酶在大腸桿菌中表達(dá)，帶有His標(biāo)簽，分子量為87 kDa和64 kDa。FucosEXO在天然條件下水解糖蛋白上的巖藻糖，在6至8的pH值范圍內(nèi)顯示出高活性，無(wú)需輔助因子或添加劑。1. 用于方法開(kāi)發(fā)的靈活格式；2. 可以結(jié)合酶以提高效率；3. 適用于自動(dòng)化工作流程；4.即用型 - 只需加水即可。Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物，用于在 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上有效水解 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖。人血清中 O-糖蛋白的富集：GlycOCATCH還可用于從復(fù)雜的樣品混合物（如人血清）中選擇性富集O-糖基化蛋白。簡(jiǎn)而言之，用Genovis的SialEXO處理血清并應(yīng)用于GlycOCATCH樹(shù)脂。洗滌樹(shù)脂，用8M尿素洗脫O-糖基化蛋白。用胰蛋白酶消化樣品并使用 RP-LC-MS/MS 進(jìn)行分析，并使用 Swiss Prot 數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定蛋白質(zhì)列表。O-糖基化蛋白以黃色表示。上海倍篤生物科技有限公司（簡(jiǎn)稱(chēng)“倍篤生物”）代理Genovis的IdeS酶等。上海凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

SialEXO是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶；甘肅用于自動(dòng)化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

用于糖蛋白去唾液酸化的凍干酶混合物。Genovis的SialEXO 凍干劑以?xún)龈煞鄣男问教峁b在 2000 個(gè)單位的小瓶中，用于 2 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 用于方法開(kāi)發(fā)的靈活格式；2. 可以結(jié)合酶以提高效率；3. 適用于自動(dòng)化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。用于水解ɑ2-3-連接唾液酸的凍干酶。 Genovis的SialEXO 2-3凍干劑以?xún)龈煞勰┑男问教峁b在500個(gè)單位的小瓶中，用于0.5mg糖蛋白的去唾液酸化。 與唾液酸酶混合物 SialEXO 相比，SialEXO 2-3 是一種 α2-3 特異性唾液酸酶，允許對(duì) α2-3 連接的唾液酸進(jìn)行靶向分析。O-和N-糖基化蛋白的高效α2-3去唾液酸化可以在1小時(shí)內(nèi)實(shí)現(xiàn)。甘肅用于自動(dòng)化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶