GalactEXO中的酶來源于Akkermansia muciniphila，并在大腸桿菌中表達。GalactEXO由兩種半乳糖苷酶組成，均帶有His標簽，組分的分子量為87 kDa和109 kDa。用于水解糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的凍干酶。Genovis的GalactEXO 凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在 2000 單位小瓶中，用于在 2 mg 糖蛋白上水解 β1-3,4-連接的半乳糖。1. 用于方法開發的靈活格式；2. 可以結合酶以提高效率； 3. 適用于自動化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可！將混合物加載到GlycOCATCH上，洗滌樹脂，并用8M尿素洗脫結合的肽。純化后，在RP-LC-MS上分離樣品。數據顯示，糖苷酸肽的選擇性純化，攜帶he心1-O-聚糖。IgA 特異性 O-糖肽富集：IgA 抗體包含 N-連接的糖基化和重度 O-糖基化的鉸鏈區域。胰蛋白酶消化IgA后，將肽和genovis 的SialEXO的混合物加載到GlycOCATCH樹脂上，并用PBS和離心洗滌。用 8 M 尿素洗脫顯示預期的 O-糖基化鉸鏈肽富集，具有不同程度的糖基化。PNGase F酶在大腸桿菌中表達，該重組基因來源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。河北固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

當在完整狀態下進行分析時，EPO的聚糖異質性導致了非常復雜的質譜圖。通過在 37°C 下在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時，可以有效地去除 N 糖（含有PNGase F酶）和 O-糖，如對應于未修飾蛋白質的單個峰所示。EPO上殘留了少量用乙酰化唾液酸修飾的O-聚糖，因為OmniGLYZOR對這種結構的水解效率低下。根據制造商Genvois的建議（在37°C下進行O/N孵育），兩種底物蛋白也用另一種市售的去糖基化產物處理，并顯示數據以供比較。另一方面，N-聚糖在內質網中翻譯地連接到未折疊的蛋白質上。這導致某些 N-糖基化位點難以被 Genovis的PNGase F 接近，或者一旦底物蛋白折疊成其天然狀態，就根本無法接近。因此，這種N-聚糖的水解需要底物蛋白以與酶活性相容的方式變性。河北固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis水解ɑ2-3-連接唾液酸的凍干酶SialEXO 2-3，裝在500個單位的小瓶中，用于0.5mg糖蛋白的去唾液酸化。

Genovis的PNGase F（肽 N-糖苷酶 F）是一種糖酰胺酶，可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復合物、雜交或高甘露糖寡糖的內層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。該酶用于MS分析前的樣品制備，以降低蛋白質異質性并實現游離的聚糖分析，并研究N-聚糖的功能作用。1. 對所有哺乳動物N-聚糖的高效水解；2.對多種糖蛋白具有活性；3.可固定在即用型離心柱產品形式；4. 自動化友好型，96孔板，用于高通量 N-糖去除。Genovis的ImpaRATOR 是一種 O-糖依賴性蛋白酶，可消化攜帶粘蛋白型。O-聚糖的蛋白質，包括唾液酸化物質、糖基化絲氨酸和 Thr 殘基的 N-末端。該酶產生攜帶 O-糖的糖肽，從而實現 O-糖譜分析、位點占用測定和 O-糖肽圖譜以及使用 LC-MS 分析的中級方法。1. 特異性廣 - 接受多種 O-聚糖變體，包括唾液酸化物種；2. 可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點的 N 末端；3. 穩健的消化，增強復雜生物制藥的表征。

用于水解β1-3,4-連接半乳糖的固定化酶在離心柱中的糖蛋白上。Genovis的GalactEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯的GalactEXO酶，用于糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的水解，而不會用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. z終樣品中不含酶。GalactEXO 酶來源于 Akkermansia muciniphila 并重組表達，可有效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖。GalactEXO微離心柱經過格式化，可在30-60分鐘內水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。OglyZOR 來源于口腔鏈球菌，在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽，分子量為 227 kDa。

Fc N-聚糖在抗體的效應功能中起著至關重要的作用，但可能會增加蛋白質表征測定的復雜性。在天然條件下用PNGase F去除Fc N-糖可以表征游離N-糖以及去糖基化抗體的功能和結構。 為了證明PNGase F固定化和PNGase F凍干在天然反應條件下有效去除Fc N-聚糖，對zhiliao性抗體曲妥珠單抗進行了處理。圖2中的質量數偏移表明，在37°C下用Genovis的PNGase F凍干或PNGase F固定化孵育1小時后，曲妥珠單抗上的Fc N-聚糖成功去除，與在溶液中用PNGase F凍干處理的樣品相比，沒有酶干擾用PNGase F固定處理的樣品的分析。GalNAcEXO固定化離心柱用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基。河北固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

OpeRATOR用于質譜法進行O-糖分析、O-糖肽圖譜以及中級分析，消化發生在O-糖基化位點的N端。河北固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

Genovis的SialEXO Immobilized是一種微離心柱，用于在室溫下孵育30分鐘后完全去除0.5mg天然糖蛋白上的唾液酸。為了研究依那西普的潛在電荷變體，開發了一種使用SialEXO固定化柱對糖蛋白進行去唾液酸化的一般工作流程。毛細管電泳通常用于在生物制劑的表征和質量控制過程中確定電荷變體。使用SialEXO Imfixedized對糖蛋白進行去唾液酸化，并使用ProteinSimple的Maurice在成像等電聚焦中進行分析。綜合起來，該分析工作流程改進了糖蛋白的分離并實現了電荷異構體分析。依那西普，如果不首先去除唾液酸，將很難分析，但使用SialEXO固定化分離峰可以獲得。河北固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis