Genovis的SialEXO固定化用于復(fù)雜糖蛋白的去唾液酸化:在設(shè)置反應(yīng)條件時,需要在所需的反應(yīng)時間和完成反應(yīng)所需的酶量之間進行權(quán)衡。較高的酶量可保證在更短的時間內(nèi)完成周轉(zhuǎn),但會使下游分析復(fù)雜化。為了避免此類問題,我們以離心柱形式固定了活性SialEXO。這允許以更短的孵育時間孵育具有明顯更高量的唾液酸酶的糖蛋白底物。Genovis測試了 SialEXO 凍干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制劑上的性能。這種糖蛋白是一種具有挑戰(zhàn)性的底物,具有 6 個 N- 和多達 26 個 O-聚糖,由 α2,3 和 α2,6 連接的唾液酸修飾。對游離的N-聚糖的分析表明,SialEXO在溶液中完全脫唾液酸化,SialEXO固定化。兩種酶都含有 His 標簽,酶的分子量為 43 kDa 和 66 kDa。天津凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶
Genovis的PNGase F Automation 含有以自動化友好的 96 孔板形式凍干的 PNGase F 酶。它能夠?qū)崿F(xiàn)高通量 N-糖去除,從而簡化一系列糖蛋白底物的下游分析。根據(jù)您的工作流程要求和樣品可用性。PNGase F Automation 可在 96 孔板中凍干,用于 96 x 5 μg 或 96 x 50 μg 糖蛋白上的 N-糖自動水解。1. 實現(xiàn)自動化高通量樣品處理;2. 可同時消解多達 96 個樣品;3. 兩種選擇可用于不同樣品量的消解;4. 即用型 - 只需添加您的樣品即可。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽(包括唾液酸化O-聚糖)的凍干酶。Genovis的ImpaRATOR 凍干劑以凍干粉末的形式提供,裝在 2000 單位小瓶中,用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。1. 用于方法開發(fā)的靈活產(chǎn)品形式;2.以結(jié)合酶以提高效率;3. 適用于自動化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可!天津凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶ImpaRATOR 酶不會消化未修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基,也不會在糖蛋白的N-糖基化位點。
α連接的Genovis的GalNAcs的水解:GalNAcEXO 是一種 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶,可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 殘基。與絲氨酸或蘇氨酸連接的 GalNAc(稱為 Tn 抗原)被 GalNAcEXO 快速有效地水解,并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。Genovis的GalNAcEXO 是一種外α-N-乙酰半乳糖胺酶,用于有效水解與糖蛋白(Tn 抗原)中的絲氨酸或蘇氨酸殘基相連的 α-N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc)。該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAc 上顯示活性。GalNAcEXO 在天然條件下水解糖蛋白上的 GalNAc,在 pH 值 6.0 至 7.6 范圍內(nèi)具有高度活性。
C1抑制劑的去糖基化:在O-糖基化生物制藥的生產(chǎn)過程中,由于he心GalNAc殘基的加工不完全,可能會出現(xiàn)Tn抗原。這表現(xiàn)為具有 203 Da HexNAc 單位差異的重復(fù)質(zhì)量位移。為了確認 Tn 抗原的存在,可以應(yīng)用以下工作流程,此處在重度(26 個位點)O-糖基化 C1 抑制劑上演示。首先,使用PNGaseF修剪糖蛋白的N-糖,使用Genovis的OglyZOR和SialEXO修剪he心1 O-糖。依那西普的磷性能測試?:依那西普是另一種具有挑戰(zhàn)性的生物制藥模型分子,攜帶 13 個 O-聚糖位點,其中平均 9 至 10 個位點被占用。FucosEXO酶在大腸桿菌中表達,帶有His標簽,分子量為87 kDa和64 kDa,在6至8的pH值范圍內(nèi)顯示出高活性。
生成攜帶 O-糖的糖肽,該酶可實現(xiàn) O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點占用測定,以及使用 MS 分析的中級方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點的 N 末端;2.穩(wěn)健的消化,增強復(fù)雜生物制藥的表征;3.高特異性 - 可靠的聚糖位點測定和定位。Genovis的OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶,可消化攜帶he心1 O-聚糖的蛋白質(zhì),糖基化(he心 1)Ser 和 Thr 殘基的 N 端。OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila,并以 E 表達。大腸桿菌。該酶含有 His 標簽,分子量為 42 kDa。SialEXO 來源于 Akkermansia muciniphila,并以 E 表達。大腸桿菌。SialEXO Lyophilized 中的酶也含有 His 標簽,這些組分的分子量分別為 43 kDa 和 66 kDa。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽的凍干酶。Genovis的OpeRATOR 凍干劑以凍干粉末的形式提供,裝在 2000 個單位的小瓶中,用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。PNGase F 固定化微離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的 PNGase F 酶,用于在z終樣品中酶峰減少的糖蛋白上水解 N-糖。天津凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶
GalactEXO 是一種β-半乳糖苷酶混合物,可水解 N-和 O-糖基化蛋白中的 β1-3,4-連接末端半乳糖。天津凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶
ImpaRATOR 是一種 O-聚糖依賴性蛋白酶,可催化糖蛋白和糖肽中與糖基化絲氨酸或蘇氨酸殘基相鄰的肽鍵的水解。它切割用粘蛋白型O-聚糖修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基的N-末端,包括唾液酸化物種。粘蛋白型O-聚糖是ImpaRAT活性所必需的,該酶不會消化未修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基,也不會在糖蛋白的N-糖基化位點。該酶接受 O-聚糖結(jié)構(gòu),包括唾液酸化he心 1 和he心 2 結(jié)構(gòu)以及 Tn 抗原。Genovis的ImpaRATOR 來源于銅綠假單胞菌,在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽,分子量為 97 kDa。天津凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶